§ 7. Die Assimilation von Stickstoffgas. 201 



faßt Beijerinck als „polynitrophile" Arten zusammen, die in der Mitte 

 zwischen beiden Extremen stehenden Formen als „mesonitrophil". Als 

 N-fixierend beschrieb Beijerinck zwei große, Diplococcen oder Kurz- 

 stäbchen bildende Bacterien, welche er in die neue Gattung Azotobacter 

 einreihte: Az. chroococcum mit rundlichen, meist unbeweglichen, in 

 älteren Stadien oft braun gefärbten Zellen und den lebhaft beweglichen 

 Az. agilis. Beide Formen verlangen sehr geringe Spuren von N-Ver- 

 bindungen in ihrem Substrate, wenn sie wachsen und Luft-N fixieren 

 sollen. In möglichst N-frei hergestelltem Substrate stand ihr Wachs- 

 tum bald still. Als Kohlenstoffquelle empfahl Beijerinck Mannit, der 

 nur sehr schwierig der Buttersäuregärung anheimfällt. Die Clostridien, 

 oder Granulobacter, wie sie Beijerinck nennt (1), sind nach ihm meso- 

 nitrophil und mikroaerophil, und zeigen angeblich ihre volle Wirksamkeit 

 erst dann, wenn sie als Konsorten von Azotobacter leben. 



Die Entdeckung Beijerincks wurde alsbald durch Gerlach und 

 Vogel, Winogradsky, Freudenreich verschiedenen Ortes bestätigt (2), 

 und gegenwärtig kennt man eine große Zahl von Formen (Löhnis und 

 Westermann (3) zählen derer 21 auf), die in die Gattung Azotobacter ge- 

 hören. Erwähnenswert sind die von Lipman und Burgess (4) aus ameri- 

 kanischen Böden isolierten drei neuen Arten. Az. chroococcum ist aber 

 noch immer die wichtigste Art. Durch die Zellgröße und die dicken Gallert- 

 hüllen (5) kann dieser Spaltpilz an Cyanophyceen, etwa eine farblose Aphano- 

 capsa, erinnern, und er ist auch durch die oft auftretenden sarcinaartigen 

 Bildungen und Streptococcenverbände auffallend, so daß man die Gruppe 

 Azotobacter auch vom morphologischen Standpunkte aus beibehalten 

 kann (6). Seine Morphologie hat Prazmowski (7) ausführhch behandelt. 

 Zur Isolierung der Azotobacterformen benutzt man die günstige Wirkung 

 von Kalk und Mannitlösung auf ihr Wachstum. Remy (8) schlug vor, 

 9 Teile CaCOg und 1 Teil Calciummonophosphat, mit BEUERiNCKscher 

 Mannitlösung befeuchtet, zu sterilisieren und dann in Petrischalen mit Boden- 

 aufguß zu impfen. In wenigen Tagen entstehen so große, durch den braunen 

 Farbstoff leicht kenntliche Azotobactercolonien. Organisch saure Calcium- 

 salze, wie Malat, Acetat, Lactat, Propionat sind nach Beijerinck (9) gleich- 

 falls zur Isolierung geeignet. Nach dem Anhäufungsverfahren von Gerlach 

 und Vogel läßt man 20 g frische Erde in geräumigen bedeckten Schalen 

 mit 100 ccm der Nährlösung (1000 HgO; 2 Glucose, 0,5 KH2PO4, 0,5 NaCl, 

 0,5 CaCOg, etwas FeS04) übergössen 2-3 Tage bei 28" stehen. Man findet 

 sodann auf der Oberfläche schwimmende Bacterienmassen, welche oft so 



1) Vgl. Beijerinck u. A. van Delden, Zentr. Bakt., 9, 3 (1902). — 

 2) Gerlach u. Vogel, Ebenda, II, 8, 669 (1902; 9, 817 (1902); E. v. Freuden- 

 reich, Ebenda, 10, 514 (1903). A. Koch, Verb. Ges. Nat. Karlsbad 1902, I, 182 

 (1903). Lafars Handb. techn. Mykol., 3, 1 (1904). — 3) F. Löhnis u. T. Wester- 

 mann, Zentr. Bakt., 22, 234 (1908). — 4) Lipman u. Burgess, Zentr. Bakt., IL 

 44, 481 (1915). — 5) Schleimbildung: R. Gr. Smith, Linn. Soc. N.S.-Wales (1906). 

 p. IV, Oct. 31. — 6) Systemat. Stellung: Löhnis, Zentr. Bakt., II, 42, 1 (1914). 

 — 7) A. Prazmowski, Bull. int. Ac. Sei. Cracovie (1911), p. 739; (1912), 3 B. 

 p. 87. Zentr. Bakt., 33, 292 (1912). H. Fischer, Verb. Nat. Hist. Ver. Rheinlande, 

 62, 135 (1905). B. Heinze, Ann. Mycol., 4, 41 (1906). Az. Vinelandii: J. G. Lip- 

 man, New Jersey Ex. Sta. Rep. 1908, p. 137. D. H. Jones, Zentr. Bakt., 38, 14 

 (1913); 40, 52 (1914). Proc. Trans. Roy. Soc. Canada, 7, 43 (1914). Cytologie: 

 Bonazzi, Journ. Agric. Res., 4, 225 (1915). Variation: Jones, Zentr. Bakt.", II, 42. 

 68 (1914). Pigmentbildung: Headden, Science, 40, 379 (1914). — 8) Th. Remy, 

 Landw. Jahrb., 35, Erg.bd. IV, p. 1 (1906). — 9) M. W. Beijerinck, Ak. Amster- 

 dam, 17, 46 (1908). 



