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I preparati in formalina, se riguardano gioTani stadi di sviluppo degli amfionti 

 amfionti maturi o se riguardano ghiandole salivali infette, si conservano abbastanza 

 bene mettendoli in camera umida e aggiungendo da un lato un po' di picro-carminio, 

 che dopo 24 ore si sostituisce lentamente con glicerina. Il pigmento dei parassiti 

 in questo modo si conserva benissimo. 



Purtroppo però la formalina nella diluzione suddetta altera molto i parassiti 

 malarici, producendo dei vacuoli anche molto ampi e rendendo in un istante irricono- 

 scibili gli sporozoiti non maturi ("). È veramente doloroso il constatare quanto dannosa 

 riesca la formalina ; essa mi ha fatto perdere un tempo prezioso, e mi ha costretto a 

 rifare molte delle figure del precedente lavoro (21), che rappresentano preparati alterati 

 dalla formalina. Invece gli sporozoiti interamente maturi, per quanto ho veduto, non 

 vengono quasi affatto guastati. 



Bisogna ancora notare che la suddetta formalina ha sulle ghiandole salivali un 

 effetto singolarmente dannoso trasformando il secreto delle ghiandole salivali in cor- 

 puscoli fusati in filamenti, che a fresco possono facilmente a primo aspetto scam- 

 biarsi con sporozoiti alterati; basta però un po' di pratica per distinguerli. Questo 

 inconveniente del resto si può evitare esaminando le ghiandole salivali in cloruro di 

 sodio (0,75 °/o) ovvero nella seguente soluzione: acqua distillata gr. 100, formalina 

 del commercio gr. 2, cloruro di sodio gr. 0,75. Anche i parassiti in via di sviluppo 

 neir intestino, esaminati in quest'ultima soluzione si alterano meno. Migliori risultati 

 si ottengono usando la seguente soluzione : un albume d' uovo, cloruro di sodio 

 gr. 1,50, acqua distillata gr. 250: sbatti e filtra. I preparati si possono conservare sot- 

 tponendoli ai vapori d'acido osmico e poi passandoli in glicerina. 



Se si vuol studiare il parassita malarico dal punto di vista citologico, riesce 

 utile di isolare l' intestino in una soluzione di sublimato, nella quale poi si lascia 

 per circa 2 ore; mi ha reso buoni servigi sopratutto la soluzione concentrata di 

 sublimato coli' aggiunta di cloruro di sodio al '/s °/o. Il sublimato alcoolico acetico, 

 il liquido di Flemming mi hanno dato risultati meno soddisfacenti, tranne che per 

 lo studio particolare dei nuclei. Dopo il sublimato si usano gli alcool nel solito modo. 

 Si ottengono buoni preparati trasportando gì' intestini dall' alcool in glicerina senza 

 usare colorazione di sorta; il pigmento spicca benissimo. 



Per ulteriormente studiare il parassita malarico nella zanzara occorre sezionarlo, 

 dopo averlo incluso in paraffina e far delle sezioni molto fine (da ','4 di ,u a 3-4 fi). 

 Si ottengono complete serie ; la difficoltà maggiore sta nel non lasciar piegare le se- 

 zioni più sottili, giacché pur troppo molte si piegano. 



La colorazione si fa sul vetrino portoggetto coli' ematossilina ferrica di Heiden- 

 hain coir emallume. 



I preparati d'intestino in loto spaccato con una forbice molto delicata, riescono bene 

 quando l'intestino è stato conservato in formalina. Accuratamente procedendo coll'ematos- 

 silina ferrica suddetta, si arriva a colorire il parassita, lasciando 1' epitelio dell' intestino 

 incoloro quasi ; si ottengono bei preparati, purtroppo però alterati dalla formalina. 



(") Probabilmente sippiinto perciò Ross, tratto in inganno, ha creduto che « in several insects 

 mani/ full-siged zygotes appeared not to have ripened — that is, did not contain blast ". Qualche 

 volta però nel Culex pipiens ho verificato anche senza formaliua il fatto ammesso da Ross. 



