I. Méthodes employées. 3 



tious. Celles-ci ne se font pas facilement clans ces conditions. Cependant j'.ii \m avoir qnel- 

 ques préparations très instructives en employant ce système. 



J"ai étudié les préparations ainsi obtenues dans une goutte du mélange ayant servi à 

 la macération. D'autres ont été (rolorées par le carmin boracique, i)ar TluMnatoxyline, par le 

 picrocarminate d'aunnoniaque. Un certain nombre de ces préparations ont ('té ensuite rendues 

 ])ermanentes dans la glycérine ou dans le baume de Canada. 



d) Méthode des coupes microscopiques. — J'ai préparé un grand nombre de 

 Fohjyordiiis, pour cm faire des coupes transversalement et longitudinalement verticales et des 

 coupes horizontales. Il faut que les vers soient contournés le moins possible, pour obtenir de 

 bonnes sections, pou^ant servir à l'étude. On arrive à avoir des sujets tout à fait droits en 

 les tuant par l'action progres.sive et lente de l'alcool. On ])la('c quelques vers dans un vas{>, 

 à bords assez hauts, rem])li à demi d'eau de mer fraîclie. On vide doucement sur le liquide 

 une certaine quantité d'alcool fort, cpii surnage, à cause de sa densité plus faible. 11 n'y a 

 que la nappe de liquide immédiatement en contact avec l'eau qui se mélange directement avec 

 la couclie supérieure de celle-ci. Ensuite le mélange se fait progressivement. liCs vers s'en- 

 gourdissent petit à ])etit et cessent bientôt tout mouvement. On peut alors les retirer du 

 liquid(>, les étendre i=;ur une lame de \erre et les durcir au moyen de l'alcool fort, de l'acide 

 osmique, de l'acide picrique de Kleiisenbekc, de l'acide chromique, ou bien encore par l'action 

 du sublimé corrosif froid ou chaud. Souvent les individus tués de la sorte ont l'épiderme 

 légèrement altéré et partant le système nerveux central. Une autre méthode consiste à traiter 

 directement l'animal, après l'avoir étendu à sec, ])ar une solution concentrée et bouillante de 

 sublimé corrosif. La mort étant ])resque instantanée, le ver ne se contracte que peu. J'ai 

 aussi préparé un certain nombre de ces Annélides directement et isolément par le sublimé 

 froid, l'acide acétique glacial, l'acide cliromitiue faible, l'acide picrique de KLEiNENHF.nn, l'al- 

 cool à 65", l'alcool absolu, l'acide osmique t",ii ou le chlorure d'or à l"/'ii. Le sublimé cliaud 

 altère aussi (pielque peu les tissus, surtout l'épiderme. Entin j'ai employé avec un certain 

 succès un mélange d'acide osmique l"/,, et d'acide chromique 2"/iiii, en parties égales. 



Je me suis servi de diverses matières colorantes. J'ai employé spécialement le carmin 

 boracique après l'action du sul)limé et de l'acide chromique; le picrocarminate d'ammoniaque 

 à 17(1 après l'alcool, l'acide osmique et l'acide picrique; l'hématoxyline et les couleurs d'ani- 

 line après l'acide chromique. C'est le pic-rocarminate et le carmin boracique qui m'ont donné 

 les plus belles colorations. I^e picrocarminate est mal retenu par les éléments des tissus qui 

 ont été traités par l'acide chromique ou par le sublimé, mais on peut l'employer avantageuse- 

 ment, même dans ce cas, en renforçant la teinte par le carmin boracique (24 heures dans 

 picrocarminate, puis 2 heures dans carmin boracique). 



J'ai fait des coupes transversales d'une extrémité à l'autre chez P<>Ij/(/or<lùis et des cou- 

 pes longitudinales et verticales intéressant tout le corps de ces vers. Ces séries de cou- 

 pes faites au microtome de Jung de Heidelberg mesurent de '/o,,,, à \/m de millimètre d'é- 

 paisseur. 



