500 LA PER0XYDA8E EXISTE-T-ELLE 



à 0,3 "o de peroxyde d'hydrogène chimiquement pur (Merck), 

 on constate que le mélange se colore peu à peu en jaune brun 

 allant jusqu'au rouge brun. Mais même abandonné pendant 

 des journées entières en vase clos, le mélange ne prend pas la 

 moindre coloration violette. Harden et Zilva admettent sans 

 autre forme de procès que c'est la peroxydase qui provoque la 

 coloration violette d'un mélange de p-phénylènediamine et de 

 peroxyde d'hydrogène. Or, ce n'est pas le cas. Traité par une 

 goutte d'une solution très active de peroxydase longuement 

 purifiée par ultrafiltration, le mélange de p-phénylènediamine 

 et de peroxyde d'hydrogène ci-dessus mentionné a pris une co- 

 loration un peu plus foncée et a laissé déposer une poudre rou- 

 geâtre, mais même au bout de 48 heures, il n'a pas accusé trace 

 de coloration violette. En présence de ce résultat inattendu, 

 j'ai répété l'essai avec des solutions de peroxydase ordinaires 

 et dans tous les cas sans exception, j'ai obtenu immédiatement 

 la coloration violette. L'étude de ce phénomène a révélé que 

 pour la formation du colorant violet, il faut en premier lieu 

 l'intervention d'un acide ou d'un sel acide. Comme la solution de 

 peroxydase purifiée par ultrafiltration présentait une réaction 

 parfaitement neutre, on conçoit qu'elle n'ait pas provoqué la 

 coloration violette du réactif. Mais en ajoutant au mélange une 

 goutte d'acide acétique étendu, la coloration violette se produit 

 instantanément. Harden et Zilva relatent que les acides retar- 

 dent ou empêchent la coloration violette du mélange. Mais ceci 

 n'est vrai que pour autant qu'il y a excès d'acide. Ainsi que le 

 montrent les expériences suivantes, l'intensité de la coloration 

 violette augmente avec la concentration de l'acide jusqu'à un 

 maximum qui correspond presque exactement au rapport 

 p-phénylènediamine : acide = 1 mol. : 0,5 mol. Au delà de cette 

 limite, la coloration violette ne se produit point. Les expé- 

 riences ont été effectuées comme suit : 



Dans 10 tubes colorimétriques, on a versé 1 cm' de solution 

 0,2 normale de p-phénylènediamine, 1 cm" de peroxyde d'hy- 

 drogène à 0,3 %> des quantités croissantes d'acide chlorhydri- 

 que et de l'eau jusqu'à concurrence de 10 cm\ Dans la pre- 

 înière série d'expériences, on a employé de 0,2 à 2 cm' d'acide 

 chlorhydrique 0,01 normal. Au bout de quelques minutes, tous 



