DANS L'ACTION DE LA PHÉNOLASE 485 
une capsule de porcelaine spacieuse, et le mélange a été chauffé 
au bain-marie à la même température pendant 3 minutes. La 
tyrosinase a été complètement détruite, mais l’extrait obtenu 
s’est trouvé être le plus riche en phénolase parmi tous ceux que 
l’un de nous (B.) ait dans sa longue expérience jamais eus entre 
les mains. 1 goutte de cet extrait a produit dans 5 ce. d’une 
solution à 2 °/ de gaïacol instantanément une coloration rouge 
intense et aussitôt après un dépôt de tétragaïacoquinone. Avec 
le réactif de Rôhmann-Spitzer, il y a eu formation instantanée 
d’indophénol. Le pyrogallol a fourni au bout de 3 minutes un 
précipité considérable de purpurogolline. La richesse extraor- 
dinaire en phénolase de cet extrait s’explique probablement par 
le fait que, par l’action de la chaleur sur la pulpe, une quantité 
beaucoup plus grande de phénolase active s’est formée à partir 
de son zymogène qu’il n’en a été détruit. 
L’extrait filtré à travers un linge a été additionné de 2 °/, de 
sulfate de magnésie cristallisé et, après dissolution du sel, de 
son volume d’alcool à 98 °/o, le précipité formé a été séparé par 
le filtre et la portion filtrée claire à été traitée par 3 volumes 
d’alcoo!l à 98 0/0. Il s’est immédiatement formé un précipité vo- 
lumineux qui a été séparé par le filtre, lavé avec de l’alcool 
fort et séché dans le vide sur du chlorure de calcium. La masse 
sèche blanc grisâtre obtenue a été dissoute dans peu d’eau, la 
solution a été filtrée et de nouveau précipitée par 3 volumes 
d’alcool fort. Nous avons ainsi obtenu une poudre légère pres- 
que complètement blanche, très soluble dans l’eau et possédant 
toutes les propriétés oxydantes de l’extrait primitif. 
Pour pouvoir nous rendre compte de l’influence que divers 
sels exercent sur la phénolase dans l’oxydation des substrats 
énumérés plus haut, il était indispensable d’élaborer une mé- 
thode d’analyse applicable à tous les cas. Après quelques tâton- 
nements nous avons adopté la méthode suivante : 
Une série de flacons Erlenmeyer de 100 cc. de capacité et 
munis de bouchons percés de deux trous et portant des tubes 
d’adduction et d’abduction, a été disposée en batterie reliée à 
un aspirateur. Chaque fiole a reçu 50 cc. de liquide renfermant 
quantités déterminées de ferment, de sel et de substrat. La 
quantité de phénolase a été dans chaque cas de 5 mg., celle de 
ARCHIVES, t. XXXIII. — Juin 1912. 34 
