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Karb en: Hämalaun-Eosin, Hämalaun-Säurefuchsin,< lentianaviolett-Safranin, 

 Eisenhämatoxylin-Rubin, Biondilösung, Ehrlich 8 Triacid, Kresyl- 

 violett, Hämalaun - Triacid, Mucikarmin - Orange^ Mncikarmin- Eosin. 



VI. 



Heißes Sublimat, 5% säurehaltig; zirka 90° ('. 



(50 cm a wässr. konz. Subl. + 2,5 cm 3 Eisessig.) 

 9. — 12. Juli 1918 wio V, nur immer einige Minuten später, 

 3. September, Objekte a und b geschnitten und aufgeklebt, 



23/24. September, „ a „ b gefärbt und etikettiert. 

 Färb en: Hämalaun-Safranin,Hämalaun-Orange, Biond ilösung, Hämalaun- 

 Eosin, Ehrlichs Triacid, Hämalaun- Säurefachsin, Kresylviolett, 

 Gentianaviolett-Safranin, Eisenbämatoxyliu-Rubin, Eisenhämatoxylin- 

 Kongorot, Mucikarmin-Orange, Mucikarmin-Eosin. 



VII. 



Chromosmiuiuessigsäure, zirka 22° C. 



(Flemmingsche Flüssigkeit.) 1 ) 



9. Juli 1918, 2 ganze + 2 aufgeschn. Obj. eingelegt um 3.50 *> p.m., 



10. Juli, a 1 ganzes -j- 1 „ „ in Hieß. Wass. „ 3.50 „ „ „ 



l ) Auch nach Grünhagens Methode habe ich Präparate herzustellen probiert, 

 aber gefunden, daß man sich bei Verwendung des Flemmi ngschen Fixierungsgemisches 

 bezüglich Fixationsdauer und Härtungsweise streng an die St öhr sehen Vor- 

 schriften') halten muß, das heißt vielstündige bis mehrtägige Fixierung und 

 Härtung im allmählich verstärkten Alkohol. Grünhagen verfährt nämlich bei 

 der Fixation des Frosch- und Mausdarmes folgendermaßen**): Nachdem die Tiere, „am besten 

 durch Dekapitieren", getötet worden, wickelt er die Därme „ihrer ganzen Länge nach aus der 

 Leibeshöhle heraus", schlitzt sie auf, fixiert in Flemmin gscher Flüssigkeit („mindestens 

 15 cm 3 auf je einen ganzen Frosch- oder Mausdarm", welches Quantum nach meinen Erfahrungen 

 als zu kleines „Minimum" bezeichnet werden muß, da bekanntlich immer reichlich Fixiernngs- 

 t'lüssigkeit zu verwenden ist; es sei denn, daß man oft wechsle, das heißt, die trübe durch 

 frische, reine Flüssigkeit ersetze, was aber in 5 Stunden wohl kaum mehrmals der Fall ge- 

 wesen sein dürfte) „und läßt sie darin höchstens 5 Stunden verweilen". Darauf habe „eine 

 sorgfältige Auswässerung .... unfeine -4 Stunden währende Nachhärtung in Alkohol absolut" 

 zu erfolgen. — Dieses Verfahren kann, weil nur 5 Stunden in Chromosmiumessigsäure fixiert 

 und sofort in absolutem Alkohol gehärtet wurde, keine guten Resultate ergeben; man muß 

 länger fixieren, nämlich 24 — 48 Stunden und mehr (nach Stöhr***) ist es sogar von Vorteil, 

 die Objekte bis 3 Wochen in der Flemmi ngschen Fixierungsflüssigkeit liegen zu lassen; 

 ja nach Flemmings Ancraben kann man die Präparate sogar monatelang in den stärkeren 

 Lösungen belassen) und wirklich im allmählich verstärkten Alkohol härten, wenn schon die 

 kleineren Stücke nicht 24 Stunden in jeder Alkoholart zu verweilen brauchen. 



Nur für ein einziges Fixierungsgemisch, Zenk ersehe Flüssigkeit + Formol, 

 habe ich eine bloß fünfstündige Fixation kleinerer Objekte, aher auch mit nachfolgender 

 Härtung im allmählich verstärkten Alkohol, bisweilen als genügend befunden. 



Noch eine Bemerkung. Ich weiß wohl, daß nur bei Verwendung des schwachen 

 Flemming sehen Gemisches — wie in der Regel bei der der anderen Fixationslösungen — das 

 Flüssigkeitsquantum 80 — 100 mal größer sein muß als das eingelegte Objekt, und bei Gebrauch 

 des starken Flemmi ngschen Gemisches eine etwa vierfache Menge, den eigenen Angaben 

 Flemmings zufolge, genügt. Doch ist es immer besser, reichlich Flüssigkeit zu nehmen. 



Über die Färbunssmethode Grünhagens siehe Abteilung CHI, S. 43 d. P. 



Eine weitere Fixierungsart des „ausgeschnittenen überlebenden" und speziell vor- 

 behandelten Froschdarmes und -mageus zwecks Nachweises der Aufnahme von Fettröpfcben 

 „aus dem mit Fett oder Fettemulsion erfüllten Darmrohre "t) durch die Epithelzellen ist im 

 Anhang, S. 67 d. P., kurz beschrieben (Nr. 3). 



Zu verschiedenen weiteren Versuchsfällenf) nahm Grünhagen zur „Vorhärtung"ff) 

 entweder Müll er sehe Flüssigkeit oder konzentrierte Sublimatlösung oder ein Gemisch aus 



*) 1. c.j S. 19; siehe Note 5, S. 11 d. P. 

 **) 1. c; 1. Publ., S. 140/1 ; siehe Note 2, S. 7 d. P. 

 ***) 1. c; S. 19, Fußnote 2. 



t) 1. c. ; 5. Publ., S. 535 ff. ; siehe Note 2, S. 7 d. P. 

 ti) Hier = Fixation. 



