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por extracción del oxigeno atmosférico del medio de cultivo por el va- 
cío, con la substitución de gases inertes, o con otros artificios afines. 
La medración de los elementos microbianos tiene lugar en la parte 
inferior del tubo de cultivo y su actividad parece estar en relación con 
la cantidad de sangre añadida,—ésta d2be ser no menor de un cuarto 
del caldo,—y particularmente con los pequeños coágulos que no tardan 
en formarse, 
A los 2-3 días la multiplicación microbiana es completa; el liquido 
vuelve a clarificarse totalmente, dejaudo un pequeño sedimento for- 
mado casi exclusivamente por esporas libres. 
Este sedimento corresponde a un cultivo puro de B, Chauvoei, 
cuya vitalidad y virulencia se demuestran fácilmente cultivando por 
transplante en otros medios y según dispositivo típico e inoculando ani- 
niales de experimento, particularmente el cobayo, animal de exquisita 
receptividad a la acción patógena del B. Chauvoel. 
Esta constatación fué la base de una larga serie de ensayos con 
que Tabusso, tomando como base las nuevas orientaciones y los hechos 
demostrados por diferentes investigadores (Kitt, Smith, Hibler, Ta- 
rozzi, Nitta y otros), sobre la posibilidad de cultivar en presencia del 
aire los mcirobios anaeróbicos obligados llevó a la práctica el cultivo 
en grande del B. Chauvoei en caldo de hígado peptonizado, añadido de 
una masa de pulpa de hígado y carne en partes iguales, con el dispo- 
sitivo de los cultivos aeróbicos corrientes. 
Desde hace varios años en el Instituto Nacional de Microbiología 
Agrícola, se aprovecha este método para la elaboración en vasta escala 
de la vacuna sin gérmenes contra el carbunclo sintomático, infección 
debida al B. Chauvoei. Esta vacuna corresponde al filtrado del cultivo 
por bujia-filtro bacteriológico; contiene principios tóxicos—agresinas, 
según algunos autores, —con poder antigénico, a saber inmunizante. 
En dicho medio el cultivo es excesivamente lozano y fácil. La 
preparación del medio no representa dificultad especial, que sobresalga 
de la rutina diaria del laboratorio. El cultivo en grande se realiza 
partiendo de otro cultivo de reciente obtención de un cobayo muerto 
por B. Chauvoei, y debidamente controlado. Antes de la siembra, los 
balones son calentados y rápidamente enfriados. A las 12-24 horas 
de la siembra una intensisima gasificación,—tan activa que por lo habi- 
tual hace flotar la masa sólida, —indica que la multiplicación del gérmen 
está en toda su actividad. 
La observación microscópica progresiva constata todo el ciclo mor- 
“Jológico evolutivo típico del B. Chauvoei: las formas vegetantes, las 
