(2) M. KORNILOFF. EXPÉRIENCES SUR LES GONIDIES. 115 



sorte d'impuretés et des algues qui auraient pu accidentellement se 

 trouver à leur surface. Les morceaux de lichens ainsi lavés furent 

 broyés dans un mortier préalablement flambé, avec un petit volume 

 d'eau stérilisée. Cette opération fut faite dans le but de libérer les 

 gonidies qui, dans les lichens, se trouvent emprisonnées entre les 

 filaments du champignon. Les deux espèces de lichens étant séparément 

 soumises à ce traitement, toute possibilité de mélange de leurs gonidies 

 était ainsi exclue. Les gonidies étant libérées, on ne pouvait cependant 

 pas procéder innnédiatement à leur triage ; il fallait d'abord préparer 

 une dilution convenable pour que le nombre de colonies ne soit pas 

 trop grand sur la surface du milieu de triage, ce qui aurait rendu leur 

 transport difficile. Pour obtenir la dilution voulue, on peut procéder 

 de la façon suivante : au moyen d'une pipette stérilisée, on prend une 

 goutte de liquide contenant le lichen broyé et on la met sur un porte- 

 objet. On couvre cette goutte avec un couvre-objet carré divisé lui- 

 même en seize carrés plus petits et on compte au moyen du micros- 

 cope le nombre approximatif des gonidies qu'elle contient ; en procé- 

 dant à cette opération il faut tout d'abord avoir soin de compter le 

 nombre des cellules contenu dans chacun des petits carrés et en établir 

 ensuite la moyenne. Puis on multiplie la moyenne ainsi obtenue par 

 seize qui est le nombre des petits carrés. 



D'autre part, on prépare plusieurs tubes à essai contenant chacun 

 40 cm^ d'eau stérilisée. Si l'on connaît le nombre des gouttes contenues 

 dans 10 cm^ d'eau, on peut obtenir les dilutions que l'on désire en 

 mettant dans chaque tube à essai une, deux, trois... etc. gouttes de la 

 solution dont on a compté le nombre de gonidies qui étaient contenues 

 dans chaque goutte. Nous avons ainsi préparé une série de dilutions 

 contenant chacune de 5 à 20 gonidies par goutte et nous les avons 

 utilisées pour nos triages. 



Comme milieu de triage, nous avons employé la solution nutritive 

 de Detmer, diluée au ^/s et solidifiée au moyen d'agar-agar pris en 

 proportion de 1,5 7o; dans ce cas nous n'avons pas ajouté de sucre, 

 car il faciliterait le développement des bactéries et des champignons. 



Le milieu ainsi préparé fut réparti dans des flacons Erlenmeyer et 

 stérilisé à 120» pendant un quart d'heure. Pour inoculer le contenu de 

 ces flacons, on prélève, au moyen d'une pipette stérilisée, une certaine 

 quantité de dilution préparée comme cela a été indiqué plus haut et 

 on en met un nombre variable de gouttes dans chacun des flacons 

 contenant du milieu agarisé en voie de refroidissement (30°). 



