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Sur un nouveau mode de coloration des microorganismes dans le sang, 



par M. H. Vincent, 

 Médecin aide-major de l''*' classe. 



(Communication faite dans la séance précédente.) 



La recherche microscopique, dans le sang, des microbes ou des divers 

 parasiles qui ne se laissent pas colorer parla méthode de Grarn, présente 

 souvent une réelle difficuUé^ principalement lorsque le microorganisme 

 est peu abondant ou qu'il offre de petites dimensions. Par leur nombre, 

 les globules rouges peuvent masquer entièrement ces parasites ou nuire 

 à leur examen. 



La technique que je vais indiquer remédie à ces inconvénients; elle 

 m'a rendu de grands services et facilite considérablement l'examen 

 microscopique des microbes contenus dans le sang. 



Cette méthode consiste à rendre les globules rouges invisibles, etelle est 

 fondée sur le principe suivant : les couleurs d'aniline se fixent non sur le 

 protoplasma des globules sangiiins, mais sur leur hémoglobine : c'est cette 

 dernière qui est le principe chromophile. Si donc on traite les préparations 

 par un réactif qui dissolve l'hémoglobine et qu'on fasse ensuite agir une 

 substance colorante, les hématies l'estent incolores ; les microbes demeu- 

 rent seuls colorés ainsi que les globules blancs. 



Parmi les divers dissolvants que nous avons essayés, nous nous sommes 

 arrêté au liquide suivant qui n'altère pas la forme des globules rouges 

 et ne laisse aucun dépôt, ni aucune strie sur la préparation : 



Solution aqueuse d'acide phénique (1) à o p. 100 . 6 cent, cubes. 



Eau saturée de NaCl 30 — — 



Glycérine , . . 30 — — 



Ce liquide doit être filtré. 



Voici comment il faut procéder : 



Le sang frais, étalé en couche uniforme sur la lamelle, est desséché 

 lentement, soit à la température ordinaire, soit à une très faible chaleur. 

 Tout autre procédé de fixation (passage dans la flamme, sublimé, mélange 

 d'alcool absolu etd'éther, etc.) nuirait cà l'action du réactif précédent. 



On traite les lamelles de sang par la glycérine phénosalée qu'on laisse 

 en contact pendant une demi-minute à deux minutes, selon l'épaisseur de 

 la couche de sang. L'hémoglobine se dissout entièi'ement. On égoutte, on 

 lave doucement à l'eau; il ne reste plus qu'à colorer à l'aide d'un agent 

 ap[)ro[)rié. 



(1) Employer la quantité minima d'alcool nécessaire pour dissoudre l'acide 

 phénique. 



