SÉANCE DU 14 MARS 295 



Le sang, reconnu aseptique, est immédiatement réparti clans des tubes de 

 verre d'une capacité de 30 centimètres cubes environ. 

 Deux modèles de tubes ont été utilisés : 



A) Des tubes de verre assez longs (20 centimètres) et assez étroits (2 centi- 

 mètres), lavés à l'alcool et à l'eau, fermés avec une bourre de coton et stéri- 

 lisés. 



B) Des tubes moins longs (15 centimètres) et plus larges 2 cent. 5) conte- 

 nant chacun un second tube en baudruche, fermé à une extrémité, bouché à 

 l'autre avec de la ouate et long de 18 centimètres. Pour éviter l'adhérence 

 ■entre le verre et la baudruche, nous intercalons un cylindre en papier-parche- 

 min. Pour empêcher l'accotement des parois du tube de baudruche, nous 

 plaçons dans ce dernier un mandrin en verre qui est retiré lors du rem- 

 plissage. De plus, il faut laver et brosser la paroi du tube de baudruche pour 

 la débarrasser de la fine poussière qui la recouvre. 



Des tubes A et B ainsi préparés sont ensuite remplis aux deux tiers de sang 

 oxalaté, puisé dans le ballon utilisé pour la saignée au moyen d'une pipette à 

 boule munie de deux tubulures, une verticale, une autre latérale et de grande 

 longueur. Ces deux tubulures portent, au voisinage de leur extrémité, des 

 bourres de coton qui tamisent l'air. 



Les tubes A et B remplis de sang sont aussitôt portés sur un cpntrifugeur. 

 Eu cinq ou dix minutes, la séparation du sang en trois couches (plasma, 

 globules blancs et globules rouges) est obtenue. Pour recueillir les leuco- 

 cytes, on peut opérer de deux façons : 



1° Avec les tubes A, on aspire lentement avec une première pipette le 

 sérum d'abord, puis, avec une autre pipette, les globules blancs; 



2° Avec les tubes B, on commence par retirer le plasma. Pour prélever les 

 leucocytes, deux artifices peuvent être employés. 



Par une petite ouverture faite au tube de baudruche au niveau de la 

 couche de ces cellules, couche facilement reconnaissable par transparence, on 

 introduit l'extrémité d'une pipette et l'on aspire; ou bien une ligature est 

 posée entre la couche des hématies et celle des leucocytes et ceux-ci sont 

 aisément isolés. 



Les globules blancs ainsi obtenus sont rapidement placés dans différents 

 liquides : eau chlorurée (0 gr. 60 p. 100), eau chlorurée tenant en suspension 

 des granulations de carmin, sérum de Hayem, etc. 



Ces milieux, reconnus aseptiques, sont mis dans une étuve à température 

 constante (30 degrés), celle du cheval. Ils sont contenus dans des ballons à 

 trois tubulures, réunis entre eux par des tubes de caoutchouc s'adaptant aux 

 tubulures latérales. Le premier de ces ballons communique d'une part avec 

 un gazomètre à air et de l'autre avec un appareil à acide carbonique. Le 

 débit de ces gaz est réglé de façon que la pression de chacun d'eux soii à peu 

 près équivalente à celle qu'ils ont dans la lymphe (1). Dans chaque ballon, le 

 niveau du liquide n'atteint pas celui des deux tubulures latérales; le couranl 

 gazeux passe donc À la surface des milieux, leur constituant une atmosphère 

 sans cesse renouvelée. On évite ainsi tout barbotage pouvant léser mécani- 

 quement les globules blancs. Avant de pénétrer dans la séi i<' des ballons, le 



(ij Lambling. Encyclop. chimique (M. Frémy , t. IX, p. 292, 1895. 



