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Dans un récipient de verre stérilisé, on recueille deux litres de sang 

 de veau en procédant d'une façon rigoureusement aseptique. Aussitôt 

 le caillot formé, on le détache des parois du vase, à l'aide d'une baguette 

 de verre stérilisée; on recouvre ensuite le vase et on le laisse pendant 

 quarante-huit heures dans l'obscurité dans un endroit frais. 



Au bout de quarante-huit heures, on recueille à l'aide d'une pipette 

 le sérum exsudé, mais seulement la partie absolument limpide (on 

 recueille ainsi environ 200 centimètres cubes de sérum). 



Dans un flacon d'Erlenmeyer on met alors 25 centimètres cubes de 

 sérum ainsi recueilli (après s'être assuré qu'il n'a pas été infecté) et on 

 y ajoute 75 centimètres cubes d'eau distillée et 3 centimètres cubes de 

 glycérine pure. 



On agite le tout et on met le flacon d'Erlenmeyer dans un bain-marie 

 froid que l'on porte à i'ébullition. Le mélange ne se trouble pas mais 

 devient légèrement opalescent. 



On distribue alors le liquide dans des tubes à culture à large diamètre 

 (environ 2 centimètres) en veillant à ce que la hauteur de la colonne 

 liquide ne dépasse pas 3 centimètres. Les tubes sont ensuite portés à 

 l'autoclave à 120 degrés pendant un quart d'heure. Le milieu de culture 

 est ainsi prêt. 



Je désire attirer spécialement l'attention sur ce que, si l'on procède 

 exactement suivant mes indications, le mélange sus-mentionné ne subit à 

 r autoclave à 120 degrés aucune coagulation. 



Dans le milieu de culture ainsi préparé, on ensemence abondamment 

 le bacille de Koch et on met les tubes à l'étuve à 37 degrés, en ayant 

 soin d'agiter les cultures chaque jour 



Au bout de trois à quatre jours on observe au fond des tubes ense- 

 mencés un dépôt qui se dissocie par agitation mais qui se reproduit au 

 bout de huit à douze heures. 



Au bout de huit jours, à partir de l'ensemencement, la. culture est aussi 

 abondante qu'une culture de bacille typhique en bouillon de vingt- 

 quatre heures et la culture devient encore plus riche à mesure qu'elle 

 vieillit. Si on l'agite, elle ne s'opacifie pas mais seulement se trouble 

 légèrement. 



Si on met sous le microscope une goutte de cette culture, on constate 

 que les bacilles sont parfaitement bien isolés et ne forment pas même 

 des amas de trois ou quatre éléments. 



On peut se dispenser d'ajouter de la glycérine au milieu que nous 

 venons de décrire; on n'en obtient pas moins des cultures homogènes, 

 mais leur développement se fait beaucoup plus lentement en ce cas, et 

 demande au moins quinze à vingt jours d'étuve. 



Il est possible que la première culture que l'on fera par ce procédé 

 contienne quelques amas : ils proviennent de l'ensemencement. Mais si 

 on ensemence un deuxième tube avec un demi-centimètre cube de la 



