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Pour avoir une réaction positive, il faut partir d'une solution de lutéine 

 très concentrée, et nous sommes arrivés à cette concentration, soit en 

 en appliquant au jaune d'œuf la technique que nous indiquerons à propos du 

 sérum, soit en faisant un extrait de jaune d'œuf avec de l'alcool absolu et en 

 ajoutant à celui-ci un dixième environ de son volume de chloroforme. Après 

 séparation par l'acide chlorhydrique, la totalité, ou presque, de la lutéine 

 reste dans le chloroforme. 



Si l'on ajoute alors de l'acide nitrique nitreux, on voit apparaître, dans le 

 chloroforme, une teinte vert émeraude intense, qui persiste de cinq minutes 

 à plusieurs heures, suivant la quantité d'acide nitrique et la concentration, 

 puis le vert disparaît, faisant place à une coloration feuille morte. Au bout de 

 quelques heures, on note un retour à la coloration jaune primitive, atténuée 

 d'ailleurs. Nous avons répété cette expérience plus de dix fois sur des jaunes 

 différents; jamais nous n'avons pu voir les teintes bleu outre-mer et grise 

 dont parle Zoja. Jamais non plus nous n'avons obtenu de réaction positive, 

 nous le répétons, quand la solution traitée était assez peu riche en lutéine 

 pour que ses bandes fussent encore visibles au spectroscope. 



Ces données acquises, nous avons pratiqué les réactions sur des 

 extraits de la matière colorante du sérum humain. Nous avons con- 

 centré celle-ci de 10 à 100 fois, par le procédé suivant : 



On traite 2 volumes de sérum par un mélange de 1 volume de chlo- 

 roforme et de 2 volumes d'alcool à 95 degrés. L'albumine, pour 

 laquelle la bilirubine présente tant d'affinité, est précipitée par l'alcool 

 et, en même temps, la matière colorante se dissout dans le chloroforme. 

 On filtre, on lave à plusieurs reprises avec de petites quantités du 

 mélange chloroforme-alcool; on ajoute, lentement et en agitant, de 

 Peau au liquide filtré. Le chloroforme, dont une partie considérable 

 s'est évaporée pendant la filtration, se sépare, plus ou moins jaune, 

 suivant les cas, mais ayant déjà concentré la matière colorante trois ou 

 quatre fois. S'il est trouble, il se clarifie en six à douze heures. 



On peut augmenter encore la concentration par évaporation au froid. 

 Parfois alors, les graisses contenues dans l'extrait troublent le chloro- 

 forme, mais il suffit d'ajouter quelques gouttes d'alcool pour obtenir 

 un liquide limpide. Nous avons ainsi extrait et concentré non seulement 

 la matière colorante de nombreux sérums humains frais (datant au plus 

 de vingt-quatre heures), mais aussi celle de liquides ascitiques et pleu- 

 rétiques, pour ainsi dire incolores sous faible épaisseur. Jamais, malgré 

 les examens les plus minutieux, nons n avons observé dans nos solutions 

 chloroformiques les bandes de la lutéine (1) ni, soit dit en passant, celle 



(1) Zoja a décrit et figuré les bandes d'absorption du sérum humain. 

 Malgré des examens se comptant par centaines, nous n'avons pas vu ces 

 bandes, sauf peut-être chez les femmes enceintes dont le sérum, d'ailleurs 

 peu coloré, nous a présenté, à plusieurs reprises, un léger obscurcissement à 

 la place d'une des bandes de Zoja. 



