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mélange tétrachrome 

 (Coloration élective et simultanée des noyaux cellulaires, 



DÈS FIBRES conjonctives, ÉLASTIQUES ET MUSCULAIRES), 



par M, Gabriel Delamare. 



La méthode de Van Gieson difiFérencie nettement les noyaux cellu- 

 laires, les fibres musculaires et les fibres conjonctives, mais elle ne met 

 pas nettement en évidence les fibres élastiques ; la méthode d'Unna, 

 fondée sur l'action de l'orcéine, ne montre que les noyaux et les fibres 

 élastiques. 



L'étude des tissus conjonctifs, élastique et musculaire, poursuivie à 

 l'aide de ces méthodes, nécessite donc deux séries de coupes et quatre 

 temps de coloration. 



Avec le mélange dont je crois pouvoir préconiser l'emploi, la qua- 

 druple différenciation des noyaux, des fibres conjonctives, élastiques et 

 musculaires est obtenue en un seul temps et sur une même coupe. 



Pour préparer ce mélange, on prend un volume de la solution suivante : 



Orcéine (Grûbler) 1 gramme. 



Acide chlorliydrique 1 cent. cube. 



Alcool absolu 50 cent, cubes. 



On ajoute un volume égal de la deuxième solution, ainsi constituée : 



Hématoxyline acide d'Ehrlich (1) 2 cent, cubes. 



Fuchsine acide (Grûbler) (solution aqueuse 



sat.) 1 — 



Acide picrique (sol. aq. sat. à chaud) . . . 200 — , 



Ce mélange m'a paru assez stable et susceptible de se conserver au 

 moins une semaine. 



Les coupes de matériel fixé soit par l'alcool à 90 degrés, soit par le 

 formol à 10 p. 100 ou le liquide de Bouin, sont collées avec l'eau dis- 

 tillée, déparaffînées, puis trempées dans l'eau légèrement acide et im- 

 mergées dans le mélange tétrachrome, maintenu à 45 degrés. 



Après un séjour de vingt à trente minutes dans le bain colorant, 

 les coupes sont lavées un instant dans l'eau acidifiée (IV à V gouttes 

 d'acide chlorhydrique pour 100 centimètres cubes d'eau). Après un très 

 rapide passage dans l'eau de source pour obtenir le bleuissement de 

 l'hématoxyline, elles sont déshydratées (alcools, xylol) et montées dans 

 le baume. 



(1) Les 2 centimètres cubes dliématoxyUne d'EhrUch peuvent être, sans 

 inconvénient apparent, remplacés par 4 centimètres cubes d'hématoxyline de 

 Bœhmer. 



