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la maladie d'un animal à un autre, elle microbe disparaît dès les premiers 



passages. 



. Pour produire une exaltation par le moyen ^e passages continus, nous 



avons eu recours à une méthode qui consiste : 



1° A injecter dans la cavité péritonéale du premier animal une dose 

 plusieurs fois mortelle de virus pris à la surface de gélose ; l'animal meurt 

 avec un épanchement péritonéal très riche en microbes et dont la quantité 

 et la consistance varient suivant la grosseur de l'animal : les animaux de 

 forte taille sécrètent un épanchement abondant et fluide, les animaux de 

 taille moindre donnent des épanchements moins abondants et plus con- 

 centrés; 



2° Laisser cet épanchement pendant quelques heures exposé au contact 

 de l'air, à la température ordinaire ; 



3° L'inoculer ensuite à d'autres animaux, en choisissant, pour des épan^ 

 chements abondants, des animaux de petite taille, et pour des épanche- 

 ments concentrés, des animaux de taille plus grande. 



Une série de passages continus amène le virus à l'état de virus fixe, 

 c'est-à-dire que la culture faite avec le microbe tue les animaux à la 

 même dose, après un même délai; entre le vingtième et le trentième pas- 

 sage nous n'avons plus pu distinguer d'exaltation ultérieure. 



Dans ces expériences, le virus a augmenté de force environ vingt fois, 

 et a acquis la faculté de tuer les lapins et les pigeons à des doses qui 

 étaient complètement inoffensives au début des passages. 



II. Inoculations intra-musculab^e et sous-cutanée. — Les animaux inoculés 

 avec ce virus exalté dans la jyrofondeur des muscles de la cuisse, succom- 

 bent. 



Introduit dans le tissu cellulaire sous-culané, ce virus produit un large 

 œdème qui s'étend loin au delà de la région inoculée et qui finit par la 

 mortification complète des tissus directement intéressés. Mais l'état géné- 

 ral de l'animal, malgré ce phénomène de destruction, ne subit aucune 

 atteinte, et la plaie guérit complètement, 



III. Atténuation du virus cholérique. — Nous avons atténué notre viras, 

 au point de lui enlever son pouvoir mortifiant sur le tissu, en le cultivant 

 dans du bouillon nutritif, à la température de 39° C, dans une atmos- 

 phère constamment aérée (méthode appliquée par MM. Roux et Yersin 

 au bacille de la diphtérie). Dans ces conditions, le vibrion cholérique 

 périt rapidement; pour prolonger l'expérience pendant un temps suffisant 

 pour l'atténuer, on réensemence le microbe dans un nouveau milieu 

 de culture tous les deux ou trois jours. 



Nous avons obtenu par cette méthode un virus, qui, inoculé même à 

 des doses exagérées sous la peau des animaux, n'y produit plus aucune 

 nécrose de tissu. 



