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Nous avons essayé plusieurs fois d'obtenir des cultures en sacs chez le 

 cobaye; nous n'y avons jamais réussi : même après six semaines de séjour 

 dans le péritoine du cobaye, le liquide le plus largement ensemencé, est re- 

 trouvé aussi limpide qu'au début. Il s'agit donc bien d'un microbe spécial qui 

 a pullulé en cultures successives dans le milieu particulier que les échanges 

 osmotiques ont créé, chez le lapin, à l'intérieur du sac de collodion (1). 



Comme nous le disions plus haut, la culture extraite d'un sac de collo- 

 dion après quinze à vingt jours de séjour dans le péritoine d'un lapin, si 

 riche qu'elle soit, ne donne aucune culture quand on la réensemence in vitro, 

 à l'air ou dans le vide, dans l'un quelconque des milieux, liquides ou solides, 

 ordinairement usités en bactériologie. — On peut cependant obtenir des 

 cultures à peu près semblables à celles des sacs. Mais il faut, pour cela, 

 employer comme liquide de culture du bouillon stérile, non ensemencé, 

 qu'on a fait séjourner pendant quelques semaines, à l'intérieur de sacs de 

 collodion, dans le péritoine d'une vache ou d'un lapin. Ce bouillon, quoi- 

 que non ensemencé, se modifie, lui aussi, à la faveur des échanges qui 

 s'opèrent à travers la paroi du sac; il devient légèrement albumineux; il 

 acquiert la faculté de pouvoir servir à la culture, m vitro, du microbe péri- 

 pneumonique. 



Une seule fois, nous avons obtenu, par l'ensemencement de quelques 

 gouttes de sérosité péripneumonique dans une petite quantité de bouillon 

 peptonisé fraîchement préparé, une culture analogue à celle des sacs. Tout 

 au moins, le bouillon ensemencé présentait, après soixante-douze heures 

 de séjour à l'étuve, la très légère opalescence et les petits grains mobiles et 

 réfringents qui caractérisent cette culture. Mais il ne nous fut pas possible 

 de reproduire l'expérience, ni même d'obtenir une seconde culture en par- 

 lant de celle que le hasard nous avait fournie. 



Pourtant cette observation nous confirmait dans l'idée que le virus péri- 

 pneumonique peut être cultivé en dehors de l'organisme. 



Il fallait donc trouver un milieu de culture favorable. Nous y sommes par- 

 venus après de longues recherches. Le liquide qui nous a donné les meil- 

 leurs résultats est constitué par l'addition d'une petite quantité de sérum de 

 lapin ou de vache à la solution de peptone utilisée par M. Louis Martin pour 

 la préparation delà toxine diphtérique (2). La proportion de sérum ne doit 

 pas dépasser 1/20 (S gouttes environ pour 5 centimètres cubes de solution) ; 

 on n'obtient pas de culture si l'on emploie une solution de peptone de Witte 



(1) Voir : Annales de rhistitut Pasteur, avril 1898. « Le microbe de la péripneu- 

 monie », par MM. Roux, Nocai'd, Borrel, Salimbeni et Dujardin-Beaumetz. 



(2) Annales de l'Institut Pasteur, 25 janvier 1898. 



