532 SOCIÉTÉ DE BIOLOGIE 



Réactif nitrique nitreux : 



Acide nitrique pur à 36° 200 centimètres cubes. 



Eau distillée 100 — — 



Nitrite de soude gr. 06 



Le flacon doit être soigneusement bouché, sinon l'acide nitreux abandonne 

 le réactif qui perd de son activité. 



Une quantité plus grande de nitrite affaiblit aussi sa sensibilité. 



Milieu albumineux artificiel {sérum artificiel). — Blancs d'œufs additionnés 

 d'un volume d'eau salée physiologique, battus et laissés au repos pendant 

 vingt-quatre heures. Les membranes restent agglomérées sur les parois du 

 vase, le liquide collecté dans le fond est décanté, puis additionné de soude 

 caustique dans la proportion de 0,5 p. 100. 



Par sa fluidité, sa teneur en albumine et son alcalinité, ce milieu se rap- 

 proche du sérum sanguin. Il est incolore sous une épaisseur de 1 centimètre. 

 Il se coagule sous l'influence du réactif nitrique. D'abord blanc, le coagulum 

 prend bientôt, au point de contact avec l'acide, une teinte jaune (réaction xan- 

 thoprotéique), qui progresse de bas en haut. A l'union des zones blanche et 

 jaune, il n'existe aucun phénomène coloré, aucun anneau bleu notamment. 



Solution de bilirubine. — Dans le sérum artificiel on fait des solutions de 

 bilirubine cristallisée à 1/1000 et 1/5000. Ces solutions s'altérant rapidement 

 doivent être préparées et employées ex-temporanément. 



Dilutions dam le sérum artificiel. — A des volumes exactement mesurés de 

 sérum artificiel, on ajoute à l'aide de pipettes graduées des quantités déter- 

 minées de précédentes solutions, et c'est sur ces dilutions que sont pratiquées 

 les réactions dont nous allons exposer les résultats. 



Une solution de bilirubine à 1/330.000 (i), solution la plus faible 

 que nous ayons étudiée, présente déjà une nuance jaunâtre, extrême- 

 ment légère, mais appréciable par comparaison avec le sérum artificiel. 



De 1/35.000 à 1/55.000 le réactif de Gmelin ne donne naissance à 

 aucun phénomène coloré. 



De 1/55.000 à 1/40.000 on observe une ombre légère, visible seule- 

 ment par comparaison avec les tubes précédents. 



C'est seulement à 1/40.000 que l'anneau bleu décrit par M. Hayem, 

 mais présentant toutefois un reflet violet et non pas vert, devient visible 

 nettement pour un œil excercé par l'étude des modifications progres- 

 sives observées dans les tubes précédents. 



Ce degré de concentration constitue, dans les conditions où nous 

 nous sommes placés, la limite de la sensibilité de la réaction de Gmelin. 

 Dans les tubes de 2 à 3 millimètres employés par M. Hayem, la réaction 

 demeure encore négative. De 1/11.000 à 1/7.000 on constate un liseré 

 bleu avec reflet verdâtre [réaction de Hayem). De 1/7000 à 1/3500, deux 



(1) La préparation de la bilirubine chimiquement pure présente des diffi- 

 cultés considérables, aussi ne donnons-nous pas ces chiffres comme absolus; 

 nous les considérons cependant comme très voisins de la vérité. 



