SÉANCE DU 7 NOVEMBRE 1293 



ordinaire, simplement étranglée », des faits analogues d'Achalme, la 

 tolérance progressive du « Streptocoque anaérobie » pour Toxygène 

 nous engageaient à poursuivre ces expériences. 



Nous avons pu les mener abonne fin en utilisant les cultures en tubes 

 cachetés {Soc. de Biol., 18 oct. 1902) et en tubes profonds de milieux 

 liquides. Voici la technique que nous avons suivie : 



Nos expériences ont porté essentiellement sur le bacille du botulisme, 

 le bacille d'Achalme et le bacille de Lf^gros, puis sur le Streptocoque 

 anaérobie que nous avons retrouvé, etc. Nous appelons surtout l'atten- 

 tion sur les expériences faites avec les trois premiers germes : ces 

 bacilles ont en effet un chimisme bien particulier qui permet un 

 contrôle rigoureux et élimine toute erreur. 



Tout d'abord on obtient une culture en lait cacheté. A ce propos nous 

 devons dire que la hauteur du bouchon de lanoline, fixée dans notre 

 première communication à 1 centimètre 1/2, peut être abaissée à 3/4 de 

 centimètre sans que la méthode perde de sa rigueur absolue [Soc. biol., 

 17,1,1903). 



A. — Quand la culture est abondante, on commence par habituer les 

 germes au contact passager de l'air; pour cela, on chauffe légèrement, 

 avec un bri\leur de bec Bunsen, le tube cacheté au niveau dii bouchon de 

 lanoline, de façon à faire fondre ce bouchon, ou si possible à le décoller 

 simplement; on incline alors légèrement le tube, et la culture se trouve 

 ainsi devenue une culture aérobie. Après une heure, on fait refondre la 

 lanoline, et on remet le tube redressé à l'étuve. Cette manœuvre se 

 répète trois ou quatre jours de suite. 



B. — Dans une deuxième phase, on ensemence avec le tube initial 

 un tube profond de lait; nous désignons ainsi des tubes ordinaires 

 contenant une colonne de lait de 18 à 20 centimètres de hauteur. Ce lait 

 doit être privé de crème : sinon, la crème pourrait transformer Je tube 

 de lait en un véritable tube cacheté; nous avons l'habitude de mettre au 

 fond de nos tubes une petite quantité de carbonate de chaux, pour 

 éviter l'acidiflcalion du milieu. On obtient ainsi une culture aérobique 

 en lait profond, culture, il est vrai, qui n'est abondante qu'au bout de 

 quelques jours. 



Ce tube sera utilisé pour une double série de manœuvres : 



1° Le tube même, par prélèvement des parties profondes, occupées 

 par les germes les moins adaptés, sera ramené de deux jours en deux 

 jours à 16, 15, 13, 11 centimètres, jusqu'à 5 et 3 centimètres ; 



2° Ce tube sera repiqué par des prises faites dans les parties hautes, 

 dans le fond de tubes de lait de 17, 16, 13, 14 centimètres, etc. 



Chose curieuse, lorsque les repiquages de lait en tube de 4 et o centi- 

 mètres sont positifs et donnent des cultures abondantes, l'eau peptonée- 

 hydrates de carbone de même hauteur donne des repiquages négatifs. 



C. — Il faut alors recommencer la même série descendante, soit 

 Biologie. Comptes rendus. — 1903. T. LV. 94 



