SÉANCE DU 28 NOVEMBRE 1307 



enOn à oxyder les dérivés sulfonés parle permanganate titré. Une autre 

 méthode a été proposée récemment par M. Monfet 1 , consistant à nitrer 

 les couleurs indigotiques et à doser colorimétriquement l'acide picrique 

 formé.. Ce sont les phases successives de ce procédé que je dois exa- 

 miner. 



A. Traiis format ion de l'indoxyle en couleurs indigotiques. — On sait 

 aujourd'hui que pour être bien faite, cette transformation exige cer- 

 taines précautions indispensables : défécation de l'urine par le sous- 

 acétate de plomb (Boumai, suppression presque complète des oxydants 

 (Maillard . épuisement de la solution chloroformique par l'eau acide 

 (Maillard , épuisement de cette même solution par l'eau alcaline Mail- 

 lard . La technique de M. Monfet ne saurait donc conduire au but, car: 

 1° une partie de l'indoxyle est suroxydé : 2° l'extrait chloroformique est 

 mêlé d'impuretés jaunes et brunes dont la présence est une cause 

 d'erreur considérable pour un dosage colorimétrique de picrate. Mais 

 avec les précautions que j'ai déjà indiquées 2) la transformation de 

 l'indoxyle en indigotine et indirubine se fera bien : on peut donc pour- 

 suivre l'examen de la méthode par nitration. 



B. Transformation des couleurs indigotiques en acide picrique. — On 

 sait depuis longtemps que l'action de l'acide nitrique transforme gra- 

 duellement l'indigo en isatine, aldéhyde nitrosalicylique, enfin acide 

 picrique. Mais si, pour le début, il suffît d'une oxydation que l'acide 

 nitrique étendu peut produire, pour le terme final il faut au contraire 

 une nitration énergique, qui paraît exiger de l'acide concentré. 



J'ai donc, à l'exemple de M. Monfet, évaporé à sec la solution chloro- 

 formique violette retirée de 100 ce. d'urine riche en indoxyle. Puis j'ai 

 ajouté oO ce. d'eau et 3 ce.' d'acide nitrique, et maintenu l'ébullition 

 pendant cinq minutes. En fractionnant, par des procédés appropriés, le 

 produit neutralisé, j'ai retrouvé : 1° toute l'indirubine, inattaquée dans 

 ces conditions ; ^^ une trace d'isatine, caractérisée par la réaction de 

 l'indophénine: 3" une très petite quantité seulement d'acide picrique, 

 caractérisé par la réaction de l'isopurpurate. Il en résulte que, par cinq 

 minutes débullition avec l'acide nitrique étendu, l'un des deux consti- 

 tuants de l'extrait chloroformique, l'indirubine, reste inattaqué ; l'autre, 

 l'indigotîne, reste en majeure partie à l'état d'aldéhyde nitrosalicylique. 



La technique de M. Monfet ne peut donc être utilisée ici, mais on 

 obtiendra facilement la transformation en acide picrique^ en chauffant 

 quelques instants arec l'acide concetUré. 



C. Dosage de l'acide picrique. — Le produit, transformé en sel de K, 

 peut être dosé colorimétriquement, et la méthode a déjà servi pour 



(1) Comptes rendus de la Société de Biologie, t. LY, p. 1251, 31 octobre 1903. 



(2) Voir pour les détails : L. Maillard, L'indoxyle urlnaire et les couleurs qui 

 en dérivent, Paris, Schleicher, 1903, pp. 67-87. 



