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limite) correspond toujours à une concentration définie de bilirubine y. 

 D'autre part, dans un sérum très riche en pigments biliaires, la dilution 

 progressivement croissante atténue Fintensité de la réaction de Gmelin, 

 représentée seulement, à un moment donné, par un anneau bleu très 

 léger, semblable au précédent; puis l'acide nitrique ne produit plus 

 le moindre liséré coloré. 



Lorsqu'apparaît l'anneau bleu limite, il est permis de supposer que la 

 teneur en bilirubine est voisine de /, que nous avons évaluée précé- 

 demment à 1/40000 pour un tube de 1 centimètre de diamètre. Connais- 

 sant alors la proportion du sérum initial et du sérum artificiel dans le 

 mélange, il est facile de calculer la quantité de bilirubine contenue 

 dans le premier. 



De là découle un procédé de dosage simple, de beaucoup plus sen- 

 sible que ceux connus jusqu'à ce jour, applicable à tous les sérums 

 dont la concentration en bilirubine dépasse /, nécessitant seulement 

 une instrumentation et des réactifs peu compliqués. 



Instrumentation. — Tubes cylindriques à fond plat d'un centimètre de 

 diamètre. Support pour les recevoir. Pipette SN de 1 c. c. 1/2, divisée avec 

 précision en vingtièmes de centimètres cubes. Pipette S A de 2 centimètres 

 cubes, graduée au quart de centimètre cube. Pipette R N, à extrémité effilée, 

 permettant de mesurer approximativement c. c. 23. 



Réactifs. — Réactif de Gmelin dilué et sérum albumiueux artificiel préparés 

 d'après les formules indiquées par nous antérieurement {loc. cit.). Le sérum 

 artificiel est laissé au repos trois ou quatre jours. Il se forme un précipité qui 

 entraîne, en partie, les matières colorantes du blanc d'oeuf. Le liquide sur- 

 nageant paraît complètement incolore, sous une épaisseur d'un centimètre. 

 Il est conservé au frais et ne peut servir plus d'un mois, la coagulalion par 

 l'acide nitrique devenant alors moins dense et les anneaux étant moins nets. 



Technique. — Distribuer, avec la pipette S A, exactement c. c. 5 de sérum 

 artificiel dans les tubes fixés sur le support. Ajouter, avec la pipette S N, des 

 quantités croissantes de sérum à doser : une division (1/20 de centimètre 

 cube)' dans le premier tube, deux dans le deuxième, etc. Agiter. Par la 

 pipette R N, déposer au fond des tubes 1/4 de centimètre cube de réactif de 

 Gmelin. Après une demi-heure de repos, examiner en plein jour, à l'abri 

 des rayons directs du soleil, le dos à la lumière et l'œil regardant le premier, 

 le deuxième tube, etc., sous un angle de 45 degrés. 



Quand le sérum à doser n'est pas trop coloré, la réaction reste négative 

 dans les premiers tubes, puis, dans l'un des suivants, apparaît un 

 anneau bleu léger, mais net ; au delà, le Gmelin est plus intense. 



Si le premier anneau est très léger, on considère que la concentration 

 atteint, dans le tube correspondant, la limite /, et la teneur en bilirubine 

 du sérum initial se calcule par l'équation : 



10 + g 10 -f g 1 



