DIAGNOSTIC DES BACTERIES PAR LEURS FONCTIONS BIO-CHIMIQUES 249 



disparaît par le refroidissement pour reparaître quand on élève la 

 température. Il faut donc filtrer la liqueur bouillante si l'on veut 

 se débarrasser de la cause du trouble. » 



Les modes opératoires en usage dans certains laboratoires pour 

 la préparation du bouillon sont à réformer entièrement et surtout 

 à simplifier. Pour ma part je propose le modus operandi suivant 

 employé à l'Institut Pasteur pour la préparation du bouillon 

 simple : 



1° Macération de la viande hachée dans le double de son poids 

 d'eau froide, pendant un temps (1) que l'on pourrait déterlminer et 

 fixer expérimentalement. 



2° Passer avec expression et porter le liquide à l'ébullition pen- 

 dant quelques minutes. Les matières albuminoïdes sont ainsi coagu- 

 lées entièrement. 



3° Filtrer sur un filtre mouillé pour se débarrasser des traces de 

 graisse entraînées mécaniquement. Le liquide ainsi filtré est à 

 peine coloré et acide. 



4° Alcaliniser légèrement, mais franchement, avec de la soude 

 diluée. Il se produit un trouble dû à la précipitation des phos- 

 phates terreux. 



5° Porter le liquide alcalinisé à l'autoclave à 120» pendant un 

 quart d'heure ; puis filtrer le liquide encore chaud, pour le débar- 

 rasser des sels organiques de chaux. 



6° Le répartir dans des récipients ad hoc (tubes à essai, ballons, 

 etc.) et stériliser à 120». 



Le bouillon ainsi préparé reste limpide et ne doit pas se troubler 

 par la chaleur. Quand cet accident vient à se produire c'est qu'on 

 n'a pas assez alcalinisé. 



L'alcalinité à donner au bouillon pourrait être déterminée par 

 des expériences préalables et fixée une fois pour toutes (2). 



Malheureusement, en supposant tranchée la question de tech- 



(1) 18 à 24 heures, d'après le Comité américain. 



(2) Le Comité américain prescrit de neutraliser le bouillon et tous les milieux 

 de culture en général, en se servant de phènol-phtaléine comme indicateur et 

 d'ajouter ensuite lcc5 de soude normale par lOO'c pour lui donner le degré d'alcali- 

 nité convenable, ou plutôt de l'additionner d'une quantité de soude telle qu'après 

 stérilisation, il soit nécessaire d'employer Iccg d'acide chlorhydrique normal par 

 lOOcc pour le neutraliser. 



