DIAGNOSTIC DES BACTERIES PAR LEURS FONCTIONS BIO-CHIMIQUES 271 



On commence par préparer une solution renfermant pour 100 ce. 

 2gr. d'urée et 1 gr. de peptone ; on le répartit dans deux ballons 

 qu'on stérilise à 110° pendant un quart d'heure. L'un des ballons 

 est ensemencé, l'autre sert de témoin pour déterminer la petite 

 quantité d'urée décomposée pendant la stérilisation. 



Pour doser l'urée décomposée on évapore, au bain-marie, 10 ce. 

 de la culture dans une petite capsule de porcelaine et on la main- 

 tient pendant une demi-heure à 100° a})rès dessiccation. Le carbo- 

 nate d'ammoniaque formé est ainsi éliminé. Le résidu est repris par 

 l'eau et l'urée dosée au moyen de l'hypobromite. La différence donne 

 la quantité d'urée transformée en carbonate d'ammoniaque (1). 



Nitrates. — On commence par préparer deux solutions qu'on 

 répartit dans des tubes à essai, l'iine renfermant 1 gr. de nitrate de 

 potasse, et 1 gr. de peptone pour 100 ce. d'eau distillée, la seconde 

 1 gr. de nitrate de potasse pour 100 ce. de bouillon nutritif. Deux 

 tubes de chaque série sont ensemencés et placés à l'étuve à 37°. 



Dans le cas d'un ferment dénitrifiant vrai les deux solutions 

 donneront lieu à un dégagement gazeux. Pour un ferment déni- 

 trifiant indirect, le bouillon nitrate fermentera seul. Mais, qu'il y 

 ait ou non fermentation apparente, il faudra toujours rechercher 

 dans les solutions la présence de nitrites, et noter avec soin le 

 résultat obtenu. 



Pour la recherche des nitrites je me suis servi du réactif de 



Griess qui se compose de deux solutions : 



Solution A. 



Chlorhydrate de naphtylamine gr.20 



Acide chlorhydrique 1 ce. 



Eau distillée 100 ce. 



Solution B. 



Acide sulfanilique 1 gr. 



Eau distillée 100 ce. 



On ajoute, dans le tube à essai contenant la culture, 1 ce. de 

 chaque solution et on agite. S'il y a des nitrites on obtient une 

 coloration rouge plus ou moins intense. 



La décomposition plus profonde du nitrate donnant lieu à un 

 dégagement gazeux est facile à saisir quand on affaire à un 



(1) MiQUEL, Annales de Micrographie, 1889-1896. 



