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Per le preparazioni in tato di pedicelli, occorre che il riccio 

 sia rapidamente ucciso nella maniera più su accennata, allo scopo 

 di ottenere quelli ben distesi; dopo di che il riccio viene rimesso 

 nel liquido fissatore. L'ulteriore procedimento tecnico è lo stesso. 



Per le sezioni microscopiche, alla fissazione, quasi sempre in 

 soluzione di sublimato al 3 «/o in acqua distillata , deve seguire 

 la decalcificazione. Non ripeto qui le numerose prove fatte per 

 ottenere una rapida e buona decalcificazione. Mi limito solo all'e- 

 sposizione dell'unico procedimento che mi ha dato i migliori ri- 

 sultati. Tanto singoli pezzi scheletrici, quanto ricci interi (fino ad 

 un diametro di 3 cm.) dopo fissazione e disidratazione, vengono 

 rivestiti di celloidina al 2 Wq. I blocchi cosi formati e racchiudenti 

 l'oggetto , dopo un soggiorno di 24 ore in alcool a 70 7o , si tra- 

 sportano in una miscela di alcool a 70 7o (100 p.) e acido nitrico 

 al 33 o/o (10 p.). 



La decalcificazione dura da pochi giorni sino a 2 o 3 mesi, 

 secondo l'oggetto ; il liquido decalcificante va rinnovato ogni 2 o 

 3 giorni. Alla decalcifìcazione è necessario far seguire un lavaggio 

 in una miscela di alcool a 70 °/o e carbonato di calcio. L'ulteriore 

 trattamento è lo stesso, come se si trattasse di semplici oggetti da 

 includere in paraf&na. 



Le sezioni di pezzi cosi trattati non mostrano nessuna altera- 

 zione o raggrinzamento degli elementi, e colorate con Emallume 

 del Mayer ed Eosina od Grange rispondono benissimo per l'esame 

 istologico. 



La decalcificazione senza previa inclusione in celloidina non 

 è da consigliarsi perchè i tessuti privi di sostegno subiscono fa- 

 cilmente dilacerazione. Essa si può , se mai , tentare , senza gran 

 danno, nel caso di Paracentrotus che ha un guscio più resistente. 

 Il riccio, dopo un soggiorno di 24 ore in alcool a 70 ^o, si sotto- 

 pone alla decalcificazione in alcool a 90 °/o, con 1' aggiunta di 

 poche gocce d'acido nitrico. Il liquido , come sempre , va rinno- 

 vato e, se bollicine di acido carbonico rimangono imprigionate 

 nelle maglie del tessuto, conviene farle uscire, perchè esse ritar- 

 dano il processo impedendo l'attacco delle particelle calcaree. Per 

 scacciarle basta esercitare sul riccio una leggiera pressione con una 

 bacchettina di vetro : le bollicine scappano per i due fori praticati 

 in vicinanza della regione apicale prima della fissazione. Del resto 

 le bollicine si possono evitare con una decalcificazione lenta (2 o 

 3 gocce di acido in 100 cmc. di alcool). 



