112 RIVISTA ITALIANA DI SCIENZE NATURALI 



né ci è possibile lo avvalerci di tutti quei minuti e rigorosi espedienti di cui si giova la Bacte- 

 riologia. Io noa divido l'opinione del sig. Dangeard (1) che « point n'est besoin, le plus souvent, 

 de chercher à obtenir des cultures trés pures » in fatto di ricerche sulla vita delle alghe inferiori^ 

 ritengo invece che la natura del medium nutritizio costituisca un elemento di grandissimo valore 

 nella ricerca dei limiti di variabilità di una data forma e questo elemento non può determinarsi 

 senza il sussidio di colture pure e mi convincono i tentativi del sig. Beyerinck non tanto che la 

 mia propria esperienza. Tuttavia in fatto di colture di tal genere le nostre conoscenze pratiche 

 attuali si limitano al solo conseguimento di un certo maximum relativo di purezza, onde le col- 

 tivazioni medesime riescano il piìi che sia possibile scevre da estranea vegetazione e specie da 

 germi di forme affini a quelle oggetto di studio e da altre che, per quanto pei loro caratteri este- 

 riori non potessero far nascere dubbi o confusioni, potrebbero però indurre delle alterazioni nei 

 liquidi di coltura. 



Colture in tal grado pure esigono anzitutto di procedere al completo isolamento degli indi- 

 vidui dell' alga destinata alla coltura o dei germi di essa. 



I metodi di isolamento sono puramente meccanici e hanno bisogno di una grande pazienza. 

 L' operazione va fatta frazionando e sminuzzando successivamente in esigue parti una piccola por- 

 zione del medio contenente 1' alga desiderata. Si procede col seguente metodo. 



Sia p. e. da isolarsi una colonia di Pediastrum da un frammento di fanghiglia che contenga 

 a migliaia di siffatte colonie in mescolanza con varie altre alghe unicellari. Si stempera il mate- 

 riale in acqua dentro un vetro da orinolo, indi se ne prende una piccola porzione con un conta- 

 gocce e questa si versa mescolandola in una gocciola d' acqua collocata sopra un portaoggetti. La 

 gocciola viene allora esaminata al microscopio senza coprioggetti con un obbiettivo a distanza fo- 

 cale sufficientemente lunga. Tenendo fisso 1' occhio all' oculare si adatta alla gocciola la estremità 

 di un tubo di vetro sottilmente capillare cercando di farvi penetrare taluna delle colonie scelte 

 fra quelle che più convengono per dimensioni, stato di sviluppo o altro che casualmente si vedono 

 isolate. La penetrazione viene tosto per via capillare ; ma difficilmente riesce che la colonia vi 

 passi isolata; la quantità di acqua aspirata dai tubicino per quanto esigua, contiene insieme alla 

 colonia desiderata, altre colonie o alghe. Allora conviene ripetere 1' operazione. A tal' uopo si sparga 

 sopra un nuovo porta-oggetti un' altra gocciola d' acqua pura e soffiando nel tubo capillare s'inietta 

 quella minuta porzioncella d' acqua contenuta in esso liquido. Naturalmente a questo punto la scelta 

 e lo isolamento della colonia diventa più facile mediante il solito tubicino capillare. Tuttavia potrà 

 accadere che sia necessario di ripetere il procedimento una terza, o una quarta o più volte ; co- 

 munque sia e alla fine si perviene ad isolare completamente 1' alga richiesta. 



Cotesto metodo è perfettamente applicabile a qualsiasi altro germe ed anche a elementi molto 

 piccoli che trattisi di isolare. Peraltro esso non ci assicura della completa immunità delle colture, 

 potendosi facilmente insieme all' alga desiderata, asportare dei germi di Bacteri e simili che colle 

 loro esigue dimensioni si sono sottratti alle nostre indagini. Però con una certa approssimazione 

 si raggiunge lo scopo di mantener pure le nostre coltivazioni adoperando nella descritta operazione 

 dell' acqua distillata, previamente sterilizzata e sterilizzando altresì i tubi e i porta-oggetti da ado- 

 perarsi. Vero è altresì che non è possibile in questo caso ottenere un massimo grado di purezza; 

 tuttavia siffatte precauzioni bastano sufficientemente ai nostri fini. 



Punto di partenza di una coltura pura sono spesso le zoospore. Isolarle ad una ad una riesce 

 difficile, nemmeno è necessario ; basta che poche se ne asportino e che sia determinato o conosciuto 

 il numero di esse. Lo stesso dicasi di cellule vegetative aventi esigue dimensioni. ' 



I metodi d* isolamento descritti, esigono, ripeto, una grande pazienza e diligenza per parte 

 dello sperimentatore. Quando queste doti non mancano si può esser sicuri di ottenere eccellenti 

 risultati. 



{]) Natarisia, V, p. 1005. 



