841 



842 



härtet, dass auf Agar-Agar, worin sich nur 

 Salze mit Rohrzucker gelöst vorfinden, das 

 Wachsthum stille steht, sobald die geringe 

 Quantität assimilirbaren Stickstoffs daraus 

 verbraucht ist. 



Die Bindung des freien atmosphärischen 

 Stickstoffs seitens der Wurzelbacillen findet 

 desshalb unter diesen Umständen, das heisst 

 ausserhalb der Papilionaeeenpflanze und bei 

 Zimmertemperatur zwischen 10° und20°C, 

 nicht statt. Auch nach vielen Monaten 

 konnte in diesem Sachverhalt keine Verän- 

 derung bemerkt werden. 



Allein wir finden hier das Vermögen, 

 und das wusste ich früher nicht, die eering- 

 sten Spuren gebundenen Stickstoffs, sei es 

 als Nitrat, Ammonsalz, als Pepton oder Amicl, 

 bei Gegenwart gewisser Kohlenhydrate, be- 

 sonders von Rohrzucker, festzulegen als 

 Körpersubstanz. Ich konnte dieses dadurch 

 beweisen, dass ich die Bacillen in Kjel- 

 da hl 'sehen Kölbchen , welche mit einer 

 Nährlösung beschickt waren , eultivirte und 

 dann später nach Kjeldahl's Verfahren den 

 Stickstoff bestimmte. Als Nährlösung wählte 

 ich eine 2 % Rohrzuckerlösung in destillirtem 

 Wasser, woran V12X Kaliummonophosphat, 

 '/äo^Chlorcaleium u. V25 % Magnesiumsulfat 

 zugefügt waren. Obschon darin ein sehr er- 

 hebliches Wachsthum stattfindet, wobei eine 

 Bacterienschicht am Boden und an der Wand 

 desKölbchens entsteht, sowie viele Hacterien- 

 flöckchen in Suspension, mit meistens unbe- 

 weglichen Einzelbacterien und nur wenigen 

 Schwärmern, »Sternen« und Bacteroiden, so 

 konnte doch weder vor, noch nach dem C11I- 

 turversuche Ammonbildung nachgewiesen 

 werden. 



Hiermit in Uebereinstimmung stand das 

 Wachsthum denn auch bald stille, um wieder, 

 solange noch Zucker disponibel war, kräftig 

 zu weiden bei Zufügung irgend einer Spur 

 Pepton, Asparagin, Salpeter oder Ammon- 

 sulfat 2 ). 



Wurde das destillirte Wasser durch Lei- 



') Weitaus die beste Nahrung ist Pepton mit einem 

 Kohlenhydrat, sodass z. B. verdünnter Malzextract 

 eine vorzügliche Culturflüssigkeit darstellt. 



2 ) Nur sehr geringe Mengen, z. B. hundertstelPro- 

 cente, sind förderlich, grössere Zugaben dieser Körper 

 wirken giftig und hemmen das Wachsthum auf 

 immer. Selbst Peptone dürfen nur in grosser Verdün- 

 nung angewendet werden, sind jedoch in viel höheren 

 Concentrationen jz. B. 1 %) verwendbar, wie Ammon- 

 salze und Nitrate. 



tungswasser ersetzt, so war das Wachstbum 

 immer viel ansehnlicher, offenbar in Ueber- 

 einstimmung mit dem Gehalt desselben an 

 gebundenem Stickstoff. Audi konnte die neu 

 gebildete Bacterienmasse noch erhöht wer- 

 den, dadurch, dass der Gehalt an Rohr- 

 zucker in den Nährlösungen erhöht wurde, 

 z. B. bis auf 5 % , während doch 2 % schon weit 

 mehr war, als dem Verbrauch an Stickstoff 

 entsprach, sodass auch dabei den, dem Rohr- 

 zucker als Verunreinigung anhängenden 

 Stickstoffverbindungen die Hauptrolle zu- 

 kam. Die Vegetationen waren unter diesen 

 Umständen so üppig, dass ich mit voller 

 Sicherheit darauf rechnete bei der Verbren- 

 nung mit Schwefelsäure von lOOcc einer sol- 

 chen Cultur Amnion finden zu sollen: Allein 

 auch hier war der Stickstoffgehalt so ge- 

 ring, das derselbe nicht titrirt werden 

 konnte. 



Die FababaciYlen sind nach alledem zwar 

 ein ausserordentlich feines Reactiv auf mi- 

 nimale Spuren von Stickstoffverbindungen ; 

 den freien Stickstoff binden dieselben bei 

 den angeführten Versuchsbedingungen je- 

 doch nicht. 



Die Bindung solcher verschwindend ge- 

 ringen Nitrat- und Ammonmengen bei Gegen- 

 wart von Rohrzucker war mir, wie gesagt, 

 bei der Abfassung meiner ersten Abhand- 

 lung über die Wurzelbacillen 1 ; noch unbe- 

 kannt. Die Erscheinung der Symbiose tritt 

 dadurch aber in ein neues Licht. In den 

 Knöllchen häuft Bacillus radicicola die 

 letzten Spuren gebundenen Stickstoffs seines 

 Ernährungsmediums, bei Gegenwart aus der 

 Pflanze zufliessender Kohlenhydrate, als Re- 

 serveeiweiss an, und giebt dabei zu gleicher 

 Zeit Veranlassung zu einer sehr vollstän- 

 digen Erschöpfung der nächsten Umgebung 

 an gebundenem Stickstoff. Eben dieser letz- 

 tere Umstand erscheint mir gegenwärtig als 

 besonders bedeutungsvoll, und den Weg zur 

 tieferen Begründung von Hellriegel's 

 schöner Entdeckung der Assimilation des 

 freien Stickstoffs durch die Papilionaceen zu 

 bezeichnen. 



In dieser Beziehung wünsche ich noch 

 hervorzuheben, dass mir eine zu einer ganz 

 anderen Organismeugruppe gehörige, sehr 

 allgemeine , nicht mit den Papilionaceen- 

 w 7 urzeln symbiotisch verbundene Erdmikrobe 



Botan. Ztg. 1SS8, S. 725. 



