Nabokich, Zur Physiologie d. anaöroben Wachstums d. höh. Pflanzen. 327 
mit dem Syphon herauszuziehen und durch einen trockenen, steri- 
lisierten Wattepfropfen zu ersetzen, über welch letzteren man sofort 
eine Schicht von Mendelejewschen Kitt giesst oder den Hals 
unterhalb der Watte zuschmilzt. Wenn man einen anderen Destillier- 
kolben in Reserve hat, so wird derselbe kurz vor der letzteren Mani- 
pulation mit den Samen und der Bromlösung gefüllt, damit hierauf, 
nach Beendigung der Ausspülung des vorhergehenden Kolbens, zur 
Ausspülung des letzteren geschritten werden kann, wobei der oben 
erwähnte Wattepfropfen mit dem Syphon, welcher mit dem steri- 
lisierten Wasser und der Salpeterlösung in Verbindung gebracht 
wird, in den zweiten Kolben gesteckt wird. Auf diese Weise 
können wir auf einmal zwei, drei oder vier sterile Kulturen an- 
fertigen. Bezüglich der Entfernung des Sauerstoffs bemerken wir, 
dass wir es nicht für bequem fanden, den Wasserstoff-Strom oder 
das Kochen im Vakuum anzuwenden; beide Manipulationen ver- 
ursachen eine gewisse Trübung des Substrates mit dem Samen, eine 
Trübung aber stört in der Folge eine Kontrolle der Sterilität der 
Kultur. Deshalb muss man sich auf ein möglichst sorgfältiges und 
andauerndes Auspumpen der Luft vermittelst der Luftpumpe be- 
schränken, worauf man den Kolben zuschmilzt. 
Alle Experimente wurden in der Weise ausgeführt, dass auf 
100—150 ccm einer Lösung von KNO, (0,5 Prozent) ungefähr 50 
bis 60 trockene Samenkörner von Pisum sativum genommen wurden. 
Die Beurteilung der Sterilität der Kultur geschah auf Grund der 
Durchsichtigkeit der Lösung, wobei nach der Reaktion auf HNO, 
die Kulturen noch auf weitere Zeit (bis auf 10—20 Tage) unter- 
halten und beobachtet wurden, um sich zu überzeugen, dass nicht 
etwa kurz vor der Kontroll-Reaktion irgend welche Thätigkeit fremder 
Mikroorganismen auftrat. Dies war für uns von grosser Wichtigkeit 
wegen der kurzen Zeitdauer einiger unserer Versuche und in Anbetracht 
dessen, dass bei einigen Kulturen die Reaktion auf salpetrige Säure 
in periodischen Zeiträumen von je 24 oder 48 Stunden stattfand. 
Das Umimpfen des Sulstrates kann kaum als eine irgendwie über- 
zeugende Manipulation betrachtet werden, weil dieser oder jener 
Ausgang des Unimpfens der durchsichtigen Lösung immer entweder 
durch eine zufällige Sterilität der Tropfen oder durch Infektion 
während des Umimpfens selbst erklärt werden kann, was besonders 
leicht der Fall bei allen Versuchen mit anaeroben Kulturen sein 
kann, die überhaupt als komplizierte und schwierige bezeichnet 
werden müssen. Andererseits ıuft jede absichtliche Infizierung der 
Lösung nach 24—30 Stunden stets eine Trübung derselben hervor. 
Ausser den sterilen Kulturen stellten wir auch eine ziemlich 
grosse Anzahl von Versuchen mit anaöroben und aöroben Bakterien 
im Substrate an, um die Thätigkeit der Mikroorganismen schärfer 
hervortreten zu lassen. Solche Versuche wurden häufig von uns 
parallel und gleichzeitig mit den sterilen angestellt, was das beste 
Mittel ist zur Kontrollierung der Reinheit der Lösungen von HNO.. 
Bei der Auswahl der Reaktion auf HNO, blieben wir zuerst 
beim Gebrauch von JK bei Anwesenheit löslicher Stärke und 
schwacher Schwefelsäure stehen. Diese Reaktion ist ausserordent- 
lich empfindlich und augenscheinlich nicht durch das Vorhandensein 
gewisser organischer Substanzen, welche aus dem Samen diffundieren, 
