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24 Stunden ausgewaschen, während die mit vom Rath's Lösung fixirten nach dem Abspülen 

 mit Alcohol sofort in solchen von 70^ verbracht wurden. Die so fixirten und dann ent- 

 wässerten Objecte wurden nach der üblichen Methode unter Einschaltung von Xylol in Pa- 

 raffin eingebettet. Untersuchungen an lebendem Material habe ich, wenn ich von den Be- 

 obachtungen, die ich über den Zeitpunkt des Aufspringens der Antheridien in meinen Cul- 

 turen angestellt habe, absehe, nicht gemacht, vielmehr wurde alles sofort in der angegebenen 

 Weise fixirt, um in Paraffin eingebettet, dann dem Messer des Mikrotoms übergeben zu 

 werden. Das Schneiden bereitete grössere Schwierigkeiten, als ich geglaubt hatte, und wohl 

 mehr als hundert Serien waren nothwendig, um zu dem gewünschten Resultat zu gelangen. 

 Bei den jüngeren Stadien ging die Sache allerdings ziemlich glatt; die älteren Eiknospen je- 

 doch, besonders die befruchteten, zeigten sich äusserst widerspenstig. Bei Nitdla gelang es mir 

 bei älteren Stufen nie, eine brauchbare Schnittserie durch eine Eiknospe zu erhalten. Wie 

 sich später beim Schneiden von Ohara herausstellte, lag der Grund darin, dass ich Xylol- 

 Paraffin und Paraffin nicht lange genug hatte einwirken lassen; denn als ich bei Ohara die 

 Objecte 3 Tage in Xylol-Paraffin und dann etwa 8 — 14 Tage in Paraffin bei 56° beliess, 

 erhielt ich selbst bei gebräunten Eiknospen ganz annehmbare Schnitte, obgleich auch da 

 eine Zertrümmerung der Membranen nicht ausgeschlossen war. Ganz abgesehen aber von 

 der erwähnten Schwierigkeit ist es nicht leicht, die Objecte richtig zu orientiren, so dass 

 man beim Schneiden immer mehr oder weniger auf den Zufall angewiesen ist. Aus den 

 eben angeführten Gründen zerlegte ich daher jüngere Eiknospen in Schnitte von 10 ja, 

 ältere jedoch in solche von 20 \x. Auch beim Aufkleben der Serien musste ich zwischen 

 jüngeren und älteren Eiknospen einen Unterschied machen. Bei den jüngeren wandte ich 

 stets nur reines Wasser an, bei den älteren musste ich eine l°/ 00 Agar-Agar-Lösung zu 

 Hülfe nehmen, um ein Davonschwimmen zu vermeiden. 



. Die Färbung der Objecte wurde stets an den aufgeklebten Schnitten vollzogen. Von 

 den verschiedensten Färbemitteln wie z. B. Fuchsin-Jodgrün, Fuchsin-Methylenblau, Häma- 

 toxylin-Eisenalaun und Hämalaun (P. Mayer) bewährte sich letzteres am besten; ich habe 

 deshalb nach den misso-lückten Versuchen mit den anderen angeführten Mitteln dieses aus- 

 schliesslich zur Anwendung gebracht. Die mit vom Rath's Gemisch fixirten Schnitte wurden 

 der Farbstofflösung nur etwa 10 Minuten ausgesetzt und dann nach dem Abspülen mit Wasser 

 in TO^igem Alcohol differenzirt. 



Letzteres ist unbedingt nothwendig, wenn man eine gute Färbung erzielen will. Auf 

 die Zeitdauer, die die Objecte im Alcohol verbleiben, kommt es dabei gar nicht an. Es 

 kann das ebenso 5 Minuten wie eine halbe Stunde sein und selbst länger, weshalb Hämalaun 

 so ungemein bequem ist, da man bei ihm keine Gefahr läuft, zu lang oder zu kurz zu dif- 

 ferenziren. Die Färbungen, die ich damit erzielte, waren sehr scharf. Chromatingerüst, 

 Nucleolus und Kernmembran traten an den Kernen überall deutlich hervor, während das 

 Protoplasma, die Stachelkugeln, Stärkekörner, Chromatophoren und Zellmembranen fast gänz- 

 lich ungefärbt blieben. Die mit Kaliumbichromat-Sublimat behandelten Objecte färben sich 

 mit dieser Farblösung leider viel schwieriger. Man muss sie derselben mindestens 3 — 4 

 Stunden aussetzen und erhält dann trotzdem nie so schöne Bilder, wie bei den mit vom 

 Rath's Gemisch behandelten. 



Die vorliegende Arbeit wurde von mir im Frühjahr 1897 in Angriff genommen. Im Mai 

 zeigte Nitdla flexilis, die in ungeheurer Menge in den Hanflöchern von Hugstetten zu finden 

 war, die Antheridien schon weit entwickelt, die Eiknospen noch ziemlich klein. Von Nitella 

 opaca fand ich um dieselbe Zeit im Titisee nur spärliche Exemplare. Von Geschlechtsorganen 

 war an diesen, wenigstens makroskopisch, noch keine Spur zu beobachten. Erst Anfang Juni 



