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 Untei'suchungsmethoden. 



Bei vielen neueren Arbeiten über die Entwickelungsgeschichte der Sporen und Pollen- 

 körner ist ausschliesslicb, oder fast ausscliliesslicli Alcoliolmaterial verwendet worden. Bei 

 der Fixirung in diesem Medium lassen sich infolge des Keichthums der jugendlichen Sporen- 

 membranen an Wasser und infolge der Zartheit der entsprechenden Entwickelungsstadien 

 der Sporen Schrumpfungen niemals ganz vermeiden, durch die die genaue Untersuchung 

 sehr erschwert, ja unmöglich gemacht werden kann. Deshalb habe ich die Entwickelungs- 

 geschichte, so weit als irgend möglich, in allen Einzelheiten zunächst an lebensfrischen 

 Sporenanlagen in physiologischer Kochsalzlösung oder in Wasser verfolgt. 



Um jeden Zweifel an der normalen Beschaffenheit des Untersuchungsmaterials auszu- 

 schliessen, berücksichtigte ich in erster Linie die in Deutschland spontan wachsenden Spe- 

 cies, die ich mir von ihren ursprünglichen Standorten beschaffen konnte, wo sie nach meinen 

 Beobachtungen in den letzten Jahren stets reichlich reife und keimfähige Sporen producirt 

 hatten, sodann im Freien cultivirte, erst in dritter Linie Treibhauspflanzen, da bei manchen von 

 ihnen infolge des Mangels der Lebensbedingungen ihrer Heimath erfahrungsgemäss Anomalien 

 vorkommen. Da ich des Vergleiches wegen eine Anzahl solcher Arten nicht ganz entbehren 

 konnte, so wählte ich, obwohl schon aus der Kenntniss der als normal erwiesenen Ent- 

 wickelungsgeschichte der deutschen Species auf die Beschaffenheit der Sporenanlagen jener 

 hätte geschlossen werden können, doch mir solche zur Untersuchung aus, bei denen es mir 

 gelang, nachzuweisen: 1. dass sie überhaupt normale, inhaltsreiche Sporen hervorbringen, 

 und 2. dass sich solche thatsächlich aus den beobachteten Jugendstadien weiter entwickeln. 



Erst in zweiter Linie habe ich, zur Kontrolle meiner Beobachtungen an Schnitten 

 und zur Feststellung von Einzelheiten, fixirtes Material untersucht, an dem nunmehr die 

 durch die Conservirungsflüssigkeiten hervorgerufenen Veränderungen sofort erkannt imd be- 

 rücksichtigt werden konnten. 



Zur Fixirung wurden Alcohol, Sublimat 1 — 1% und Chromosmiumessigsäure nach 

 Flemming mit gleich gutem Erfolge verwendet. Zur Anfertigung von Schnitten wurden 

 die mit Wasser gut ausgewaschenen Objecte vorsichtig in Alcohol von steigender Concen- 

 tration — von 10 zu 10 oder von 20 zu 20^ — entwässert, sodann in Xylol oder Chloro- 

 form übertragen und in Paraffin eingebettet. In den sehr wasserreichen Membranpartien 

 konnten selbst bei sehr vorsichtiger Behandlung Schrumpfungen niemals ganz verhindert 

 werden. Die mit dem Mikrotom hergestellten, meist 5 — 10 ix dicken Schnitte wurden entweder 

 mit Wasser oder mit Eiweissglycerin nach P. Mayer aufgeklebt. 



Zum Nachweis der Kerne bewährte sich sehr das Hämalaun nach P. Mayer. Es 

 lieferte sofort differenzirte Bilder. 



Von den übrigen Reagentien möchte ich hier nur zwei Gruppen besprechen, die mir 

 bei der Untersuchung des Baues und der Entwickelungsgeschichte der Zellmembranen sehr 

 wichtige Dienste geleistet haben, um keine Zweifel darüber aufkommen zu lassen, welche 

 Bedeutung ich den mit ihnen ausgeführten lieactionen beimesse, nämlich die Cellulose- 

 reagentien und die, seit Mangin's Arbeiten (hauptsächlich I und II) für Membran- 

 untersuchungen so werthvoll gewordenen Pectinreagentien. Ich verwendete conc. und 

 verdünnte Schwefelsäure, verdünnte Kalilauge, Kupferoxydammoniak'); von Jodpräparaten: 



') Ich stellte es dar, indem ich den mit Ammoniak in einer Kupfersulfatlösung erzeugten und mit 

 Wasser ausgewaschenen Niederschlag in möglichst wenig Ammoniak auflöste. Das Reagens blieb mehrere 

 Wochen brauchbar. 



