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II. 



Da die bisherigen Versuche zu Widersprüchen geführt haben, so lag es nahe, die 

 Sache nach anderen, durch grössere Empfindlichkeit ausgezeichneten Methoden anzupacken. 

 Bislang wurde blos das gasanalytische Verfahren angewendet. Dieses ist ebenso wie die 

 Methode des Gasblasenzählens nur bei energisch verlaufender Kohlensäureassimilation am 

 Platze, da, wo es sich aber um kleine Sauerstoffmengen handelt, wird man wohl zu anderen 

 empfindlicheren Methoden greifen müssen, falls man die Frage entscheiden will. Ich denke 

 dabei an Engelmann's klassische Methode, basirend auf der grossen Sauerstoffempfindlich- 

 keit gewisser Bacterien, und an Beyerinck's 1 ) ingeniöses Verfahren, die Sauerstoffentbin- 

 dung durch das Aufleuchten von Photobacterien nachzuweisen. Namentlich das letztere 

 schien, da es bei ausserordentlicher Empfindlichkeit auch makroskopisches Beobachten er- 

 möglicht, Aussicht auf Erfolg zu bieten. Der genannte Autor hat hierzu bereits den ersten 

 Schritt gethan, indem er Photobacterien neuerdings als ein ausgezeichnetes Mittel zur 

 Untersuchung der Chlorophyllfunction empfahl 2 ). Er machte folgendes höchst interessante 

 und wichtige Experiment. Lebende Blätter vom Klee wurden mit dest. Wasser verrieben 

 und das Gereibsel filtrirt. Man erhält hierbei ein grünes Filtrat, in welchem das im Wasser 

 lösliche lebende Protoplasma (Irving protoplasma, which is soluble in water) und zahlreiche 

 Chlorophyllkörner vorhanden sind. Wenn man nun diese grüne Flüssigkeit mit einer Cultur 

 von Leuchtbacterien in Fischbouillon (mit "6% Kochsalz oder im Meerwasser) in einer 

 Eprouvette oder in einer Flasche mischt und das Ganze einige Zeit stehen lässt, so wird 

 die Flüssigkeit nach Verbrauch des absorbirten Sauerstoffs dunkel. Darauf dem Lichte aus- 

 gesetzt, wird die Flüssigkeit, beziehungsweise es werden die darin vertheilten Bacterien 

 infolge des im Lichte entbundenen Sauerstoffs wieder leuchtend. Ist der Blattsaft frisch 

 und wird die Flasche eine Minute oder länger in die volle Sonne gestellt, so wird soviel 

 Sauerstoff gebildet, dass die Bacterien, hierauf ins Dunkle gebracht, noch einige Minuten 

 fortfahren zu leuchten. 



Wie gross die Empfindlichkeit dieser Methode ist, geht daraus hervor, dass das Licht 

 eines angezündeten Streichbolzes genügt, um die Sauerstoffproduction und damit das Auf- 

 leuchten der Bacterien hervorzurufen. Bei mehrstündigem Stehen verliert das grüne Filtrat 

 die Fähigkeit, Kohlensäure zu assimiliren. Beijerinck zieht hieraus den Schluss, dass zur 

 C0 2 -Assimilation die Gegenwart von lebendem Plasma nothwendig ist und dass in dem Filtrat 

 derjenige Theil, welcher die CCK-Assimilation bedingt, gelöst vorkommt. Nach Beijerinck 

 bringt Friedel keinen Beweis dafür, dass es sich um eine Wirkung eines Fermentes handelt, 

 in Friedel's Experiment sei das die C0 2 -Assimilation Bedingende ebenfalls lebendes Plasma. 



Ich habe das geschilderte Experiment Beijerinck's zunächst wiederholt und habe 

 mich von der Richtigkeit desselben überzeugt. Abgesehen vom Klee erhielt ich namentlich 

 mit den Blättern von Lamium album, Sambueus nigra und Calendula officinalis sehr gute 

 Resultate. 



Die mikroskopische Untersuchung des grünen, durch Filtrirpapier hindurchgegangenen 

 Filtrates, z. B. von Lamium, ergab, dass in demselben zahlreiche Chlorophyllkörner, Stärke- 



i) Beijerinck, M. W., * Cultur versuche mit Zoochlorellen etc.« Botan. Ztg. 1890. S. 744. 

 2 ) Beijerinck, M. W., »Photobacteria as a Reactive in the Investigation of the Chlorophyll- 

 function«. Koninkl. Akad. van Wetensch. te Amsterdam. 26. Juni 1901. p. 45. 



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