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bezeichnen werden. Jedenfalls giebt die Substanz, aus welcher die Körner ganz oder vor- 

 wiegend gebildet sind, eine Reihe übereinstimmender und recht charakteristischer Reactionen, 

 die mir mindestens anzuzeigen scheinen, dass alle diese Körner aus Substanzen bestehen, 

 welche sehr nahe mit einander verwandt sind, vielleicht so nahe, wie alle Fette unter 

 einander, vielleicht auch näher. Ich glaube deshalb, dass wir das Recht haben, anzunehmen, 

 dass die Substanzen, aus welchen die verschiedenen Volutinkörner bestehen, alle zu einer 

 Stoffgruppe gehören, und dass wir das Wort Volutin in ähnlicher Weise anwenden dürfen, 

 wie das Wort Fett, Zucker etc. 



Als Typus der Volutine können wir die Substanz betrachten, welche die Volutin- 

 körner (Volutanskugeln) der Bacterien zusammensetzt, das Bacterien- Volutin. Es eignen sich 

 die Volutinkörner der Bacterien zu den mikrochemischen Reactionen gut, weil sie im Ver- 

 hältniss zur Zelle sehr gross sind und weil bei der Kleinheit der Zelle die Reactionen 

 relativ glatt verlaufen und zu beobachten sind. Bei Beurtheilung der Reactionen, welche 

 an viel grösseren Zellen angestellt werden, ist darauf zu achten, dass bei grösseren Zellen 

 alle Reagentien langsamer zu den Volutinkörnern vordringen, und dass alle Lösungsmittel 

 bei ihnen langsamer wirken. 



Wir wollen nun diejenigen Reactionen des Bacterien-Volutins aufführen, die ich zur 

 Charakterisirung des Volutins für hinreichend erachte. Ich mache dabei ausser auf die 

 Grimm e'sche Arbeit (vorzüglich auf S. 38 u. f.) auch auf mein Praktikum (1903, S. 80 u. f.) 

 aufmerksam. 



Grimme (1902) hat zu den unter meiner Leitung angestellten Versuchen über das Bacterien- 

 Volutin vorzüglich Spirillum volutans und Bacillus alvei verwandt; ich habe" zu einigen nochmaligen Prü- 

 fungen der Reactionen letzteren Bacillus benutzt. 



Beaction I. Methylenblau 1 + 10 (1 Vol. gesättigte Lösung von Ehrlich's Methylenblau, bezogen 

 von Grub 1 er , + 10 Vol. Wasser, Praktikum S. 152); \%'\g% Schwefelsäure (1 Vol. conc. Schwefelsäure, 



99 Vol. Wasser). 



Die Reaction wird in der Weise ausgeführt, dass man die lebenden oder todten Zellen in eine 

 reichliche Menge der Farblösung unter das Deckglas bringt, nach Intensivfärbung der Zellen das 

 Methylenblau absaugt und die Schwefelsäure seitlich zufliessen lässt. So bleibt das Volutin dunkelblau 

 gefärbt zurück. 



Im Allgemeinen ist über die Methode noch Folgendes zu sagen: Lässt man das Methylenblau auf 

 lebende Zellen einwirken, so färbt sich das Volutin nur langsam, stets schnell und intensiv, wenn die Zelle 

 abstirbt (bei Krankfärbung, wie ich diese Färbemethode zum Unterschiede von der Lebendfärbung, die 

 Pfeffer anwandte, nennen will). Bei Intensivfärbung tritt stets Quellung der Volutinmassen ein; bei 

 grossen Kugeln der Substanz sieht man die Peripherie zuerst blau werden und manchmal quellen die Massen 

 zu Hohlkugeln auf. Darauf hat man bei morphologischen Deutungen zu achten. Methylenblau allein färbt 

 selbstverständlich eine ganze Menge anderer Stoffe sehr leicht, charakteristisch ist aber die grosse Energie, 

 mit welcher Methylenblau vom Volutin aufgenommen wird. Die Färbung, welche die Volutinmassen an- 

 nehmen, ist oft röthiicher als die der Farblösung. Das rührt dann daher, dass im Methylenblau Methylen- 

 azur vorkommt (Michaelis, Centralbl. f. Bact. IL Abth. 1901. 29. S. 765), welches besonders energisch 

 vom Volutin aufgenommen wird. Wie wir sehen werden, färben sich oft die Zellkerne früher als die 

 Volutinmassen, dabei aber viel weniger intensiv als die letzteren. Manchmal färben sich die Zellmembranen 

 sehr intensiv mit Methylenblau. 



In den allermeisten Fällen entfärben sich, wenn man den mit Methylenblau gefärbten Präparaten 

 l^ige Schwefelsäure hinzufügt, alle Zellbestandtheile mit Ausnahme der Volutinmassen sehr bald, sodass 

 dann nur die letzteren scharf hervortreten. Methylenblau (Tetramethylthionin, chlorwasserstoffsaures, meist 

 als Chlorzinkdoppelsalz im Handel) ist ein basischer Farbstoff und bildet wahrscheinlich mit dem Volutin 

 eine Verbindung, welche durch l^ige Schwefelsäure, die Volutin nicht sofort löst, nicht zersetzt 

 werden kann. 



Aus dem, was ich zuletzt sagte, geht hervor, dass ich bezüglich der Farbenreaction durchaus nicht 

 auf dem einseitigen und dem chemisch Gebildeten ganz unverständlich erscheinenden Standpunkt stehe; 



