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Zum Nachweis, dass die Herauslösung des Volutins eine vollkommene ist, stellt man mit dem auf- 

 gekochten Präparate die Reactionen I und III an. Diese Reaction unterscheidet das Volutin vorzüglich von 

 vielen Biweisskörpern. 



Reaction V. Lösung des Volutins in Eau de Javelle. 

 Die Eau de Javelle muss nach meiner Vorschrift (Praktikum 1903, S. 151) frisch bereitet sein. Wir 

 haben früher (Grimme 1902, S. 42) nicht auf das Alter des Reagens geachtet, und deshalb hat Grimme 

 andere Resultate erhalten. Lässt man das Reagens fünf Minuten auf Bacillus alvei einwirken, so lassen sich 

 die Volutinkugeln mit Reaction I nicht mehr nachweisen. 



Reaction VI. Behandlung mit Chloralhy dratlösung (5+2, frisch bereitet). 

 Das Reagens löst bei fünf Minuten langer Einwirkung das Volutin nicht. Man kann nach dieser 

 Zeit das Volutin mittelst der Reaction I färben. Bei langer Einwirkung löst das Chloralhy drat das Volutin. 



Reaction VII, Härtung mit Formol und Kochen mit Wasser. 

 Lässt man die Objecte 30 Minuten oder länger in Formol liegen, so löst dann siedendes Wasser das 

 Volutin nicht mehr. 



Reaction Till. Kurze Behandlung der gefärbten Volutinmassen mit öligem 



Natrium carbonat. 

 Färbt man das Volutin mit Methylenblau 1+10 und behandelt es dann mit öliger Natrium- 

 carbonatlösung, so entfärbt es sich sofort. Fügt man sogleich wieder Methylenblau hinzu, so tritt 

 wieder Färbung ein. 



Ich will nun ferner noch einige weniger wichtige Reactionen des Volutins kurz besprechen. 



a. Millon's Reagens. Da wir (Grimme 1902, S, 42) vergessen haben, die Zusammensetzung 

 und das Alter des von Grimme benutzten Millon'schen Reagens anzugeben, so habe ich nochmals den 

 Versuch mit einem frisch bereiteten Reagens der Zusammensetzung: »Quecksilber 10 g, Salpetersäure (specif. 

 Gew. 1,45) 10 ccm, Wasser 20 ccm« angestellt; denn das Millon'sche Reagens wird verschiedenartig bereitet, 

 und seine Wirksamkeit als Lösungsmittel hängt von seiner Zusammensetzung selbstverständlich wesentlich ab. 

 Das Reagens, welches in der Kälte die Proteinkörner von Ricinus bald röthlichbraun färbte und sie nicht löste, 

 färbte die Volutinmassen von Bacillus alvei nicht. Bläut man die Volutinmassen des am Deckglase ange- 

 trockneten Pilzes mit Methylenblau und setzte man dann zu dem im Wasser liegenden Präparate unter dem 

 Deckglase Millon's Reagens hinzu, so tritt sehr schnell an Stelle des Volutins eine Vacuole auf. Es quillt 

 das Volutin sofort und löst sich bald. Ich konnte meist schon nach zwei bis drei Minuten das Volutin mit 

 Methylenblauschwefelsäure in der Vacuole nicht mehr nachweisen. 



b. Rohrzucke rsyrup + concentrirte Schwefelsäure. Das Reagens röthet Volutin nicht. 



c. Vanillinsalzsäure: 5 ccm Alcohol , 30 ccm Salzsäure, 5 ccm Wasser, 0,05 g Vanillin, 

 giebt mit dem Volutin keine Farbenreaction, löst es nur langsam. 



d. Fehling's-Lö sung. Legt man die Bacterien in Kupfersulfatlösung, und fügt man dann die 

 entsprechende Lösung von Seignettesalz in Kalilauge hinzu, so färben sich die Volutinmassen nicht. 



e. Jodjodkalium seh. (Praktikum 1903, S. 152) färbt nur jodgelb. 



f. Chlorzinkjod färbt das Volutin nur in der Jodfarbe und löst es nach fünf Minuten langer 

 Einwirkung nicht. 



g. Osmiumsäure, l^ige. Das Reagens färbt das Volutin nicht, fisirt aber die Massen in ge- 

 wisser Hinsicht (Grimme, S. 44). 



h. Absoluter Alcohol. Nach zweistündiger Einwirkung ist eine gewisse Fixirung eingetreten, 

 sodass sie Wasser von 80° theilweise nicht mehr völlig löst (Grimme, S. 45). Alcohol in allen höheren 

 Concentrationen löst das Volutin nicht. Chloroform und Aether lösen das Volutin auch nicht. 



i. Säuren. 5 ^ige Schwefelsäure oder Salzsäure, 25 ,%"ige Salpetersäure lösen das Volutin sofort 

 oder nach einigen Minuten. 1 %ign und Vorige Schwefelsäure löst bei 28° innerhalb 24 Stunden 

 (Grimme, S. 41). 



