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Damit ist die Literaturübersicht beendigt, und es sollen meine eigenen Unter- 

 suchungen folgen. 



Zu eingehendem Studium diente mir Sp. communis (Hassal) Ktzg. , eine schmalzellige 

 einbändrige Art, die ich am 18. März 1904 in einer kleinen Pfütze im Mooswald bei Freiburg 

 im Breisgau fand. Die ersten Zygoten waren bereits vorhanden, und im Laboratorium ging 

 die Kopulation glatt weiter, so daß schon am 22. März eine ganze Menge junger Zygoten 

 gebildet war. 



Während die Kerne in den vegetativen Zellen ohne weiteres sichtbar sind, entschwinden 

 sie, wie bekannt, der Beobachtung mit dem Eintritt in die Zygote. Untersuchung lebender 

 Zygoten konnte so nichts ergeben, fixiertes und gefärbtes Material ist unerläßlich. 



Als Fixierungsflüssigkeit benutzte ich die zweite vom Rath'sche Lösung in der Ver- 

 dünnung 1 : 10 H 2 (vgl. p. 196). Fixierungsdauer zehn Minuten, Auswaschen mit Alkohol 70 °/o. 



Das fixierte Material bettete ich zum Teil in Paraffin ein, um es in 10 ft Schnitte zu 

 zerlegen, zum Teil untersuchte ich die Zygoten ganz. 



Die Schnitte färbte ich mit Eisenhämatoxylin nach Heidenhain mit oder ohne Vor- 

 färbung in einer wässerigen Lösung von Bordeauxrot, teilweise auch Gegenfärbung mit 

 Fuchsin in Wasser gelöst. 



Weil die Osmiumsäure, die im Fixierungsmittel enthalten ist, die Kerne stark schwärzte 

 und so ihre Färbbarkeit beeinträchtigte, war es wünschenswert, diese Schwärzung vor Vor- 

 nahme der Färbung wegzubringen. Dazu brachte ich die Objektträger mit den aufgeklebten 

 Schnitten Dach Entfernung des Paraffins in eine l°/oige Chromsäurelösung, welche nach 

 etwa dreistündiger Einwirkung die Schwärzung zum Verschwinden brachte. Hierauf wurde 

 gründlich mit Wasser ausgewaschen. 



Diese Methode erwies sich vorteilhafter als die Behandlung mit Wasserstoffsuperoxyd, 

 da sie die Färbbarkeit nicht beeinträchtigte. 



Zur Untersuchung ganzer Zygoten eignet sich Sp. communis ganz gut, weil die 

 Zygotendicke bloß 20 — 25 /.t beträgt. Die Präparation zu dieser Untersuchung war folgende : 



Entfernung der Schwärzung durch Behandlung mit 1 °/o Chromsäure während 8 Stunden, 

 gutes Auswaschen mit Wasser, Färbung auf dem Objektträger, aber ohne die Zygoten an- 

 trocknen zu lassen, durch Alkohol und Xylol Überführen in Balsam. Es ist nötig, ein stark 

 aufhellendes Medium wie Balsam zu verwenden , da man nur auf diese Weise klare und 

 scharfe Bilder erhält. 



Während die Präparation junger Zygoten für die Ganzuntersuchung keine Schwierig- 

 keiten bereitet, liegen die Verhältnisse wesentlich anders bei alten Zygoten, deren dicke 

 dreischichtige Haut das Eindringen der Farblösungen verhindert, was schon von früheren 

 Autoren hervorgehoben wurde. Einige von mir in dieser Hinsicht angestellte Versuche er- 

 gaben gleichfalls ein negatives Resultat, worüber man das im Abschnitt über die Zygoten- 

 haut Mitgeteilte vergleichen möge, und ich versuchte deshalb eine andere Methode. 



Eine kleine Menge des zu untersuchenden Materials wurde auf dem Objektträger 

 unter Deckglas leicht gequetscht, wodurch die starre Zygotenhaut an einer beliebigen Stelle 

 einen Riß bekam, ohne daß der Inhalt verletzt worden wäre. Durch den Riß drangen dann 

 die Farblösungen ein. 



Zur Ganzfärbung der Zygoten eignete sich die Eisenhämatoxylinmethode vorzüglich. 

 Beim Differenzieren entfärbten sich Plasma und Chromatophoren früher als Pyrenoide und 

 Kern, und so gelang es ganz gut, Präparate zu erhalten, in denen Plasma und Chlorophyll- 

 bänder fast nicht, das Kerngerüst hellblau, die Nukleolen und Pyrenoide dunkelblau ge- 

 färbt waren. 



