232 BULLETIN DE l'hERBIER ßOISSlER (2^6 SÉR.). (16) 



le mélange, après dilution. On procède de la manière suivante : on prend 

 cinq tubes stérilisés. Dans le tube n° 1 on introduit 10 cm* d'eau et une 

 goutte du mélange naturel ou artificiel qui contient les algues. On agite 

 pour séparer les agglomérations puis, avec une pipette stérilisée on intro- 

 duit o cm* de ce mélange dans le tube n« 2 en y ajoutant en même 

 temps 5 cm* d'eau pour le diluer. On opère de la même façon pour les 

 tubes 3, 4 et 5. De sorte qu'on a cinq degrés de dilution et l'on peut 

 procéder aux ensemencements dans cinq séries de flacons Erlenmeyer 

 contenant le milieu nutritif agarisé ou gélatinisé, sur le point de se refroi- 

 dir ^ Dans chaque flacon de la première série on introduit une goutte 

 du tube no 1, dans chaque flacon de la deuxième série, une goutte du 

 tube no 2 et ainsi de suite. Au bout de 15 à 30 jours on observe que les 

 flacons de la première série contiennent de nombreuses colonies d"algues, 

 mais aussi des bactéries et des champignons. 



Il est généralement difficile de trier les colonies de celte première 

 série. Les flacons de la deuxième série renferment moins de cham- 

 pignons ; aussi le nombre total des colonies a-t-il beaucoup diminué. 

 Les flacons des trois dernières séries montrent des colonies d'algues et 

 de bactéries suffisamment éloignées les unes des autres pour permettre 

 le triage sans difficulté. 



Il arrive aussi que les flacons de la cinquième série ne renferment pas 

 de germes étrangers. 



Dans les mélanges naturels, le nombre des bactéries peut varier selon 

 l'endroit qui fournit le matériel et selon l'époque de la récolte. Il est 

 facile de comprendre que plus ce nombre est grand, plus nous mettrons 

 de temps pour l'isolement des espèces. Les colonies d'algues ne ren- 

 ferment généralement qu'une seule espèce. Elles fournissent la base 

 de nouvelles dilutions suivant la marche indiquée plus haut. Après une 

 répétition de ces opérations on arrive au triage définitif des espèces. 

 Toutes ces opérations, quoique simples et pratiques, sont longues et 

 peuvent décourager les algologues peu habitués aux manipulations bac- 

 tériologiques. Ainsi pour arriver à séparer d'un mélange une algue à 

 l'état de pureté absolue, il faut environ 2 ou 3 mois. Les espèces, une 

 fois isolées, peuvent être conservées indéfiniment en employant des 

 précautions semblables à celles utilisées en bactériologie pour la conser- 



' Il est indispensable de faire les premiers triages sur l'agar et non sur la 

 gélatine, car dans ce milieu l'opération devient difficile, si le mélange ensemencé 

 renferme des bactéries ayant la propriété de liquéfier la gélatine. 



