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In altri organi meno ossigenati il turchino di metilene assorbito 

 dai nervi può essere ridotto e quindi apparire incoloro ; ma non ap- 

 pena si espongono questi organi all' aria, 1' ossigeno di questa ossida 

 di nuovo il turchino di metilene e fa ricomparire , almeno sulla su- 

 perficie dell' organo, la colorazione dei nervi. Questo processo di ossi- 

 dazione secondaria permette in molti casi di ottenere buoni preparati, 

 anche dopo la morte dell'animale (quantunque non cos'i omogenei come 

 quelli ottenuti durante la vita) : pertanto gioverà in ogni caso tenere 

 esposti all' aria i pezzi estirpati , allo scopo di favorirne il riapparire 

 della colorazione in qualche punto deficiente. 



Determinata cosi una condizione necessaria per la riuscita della sua 

 colorazione Ehrlich riconobbe subito che tale condizione non era suf- 

 ficiente e cercò di determinarne qualche altra. 



Nel fare le sue ricerche sulle sostanze affini al turchino di meti- 

 lene Ehrlich osservò che la thionina , la dimetilthionina e il nuovo 

 azzurro di metilene di Bernthsbn per l'azione degli alcali cambiano di 

 colore e virano al rosso. Facendo poi i saggi di iniezione fisiologica 

 con dette sostanze Ehrlich ottenne , come già abbiamo ricordato , la 

 colorazione dei nervi , ma notò che questi prendevano una tinta me- 

 tacromatica, cioè volgevano al rosso. 



Da ciò Ehrlich dovette concludere che le fibre nervose hanno una 

 reazione alcalina, e che assorbendo la sostanza colorante (che come 

 vedemmo è sempre un sale) la decompongono e ne liberano la base. 



Quindi la ricchezza di ossigeno e la reazione alcalina sono le con- 

 dizioni necessarie da cui dipende la colorazione fisiologica dei nervi 

 col turchino di metilene. Se 1' alcalescenza delle fibre nervose é scarsa, 

 se sono neutre, la colorazione é difficile o nulla. 



Da quanto si è detto è facile comprendere che volendo far agire 

 un acido sui tessuti già colorati coli' intento di ottenere delle prepa- 

 razioni più differenziate (come si fa spesso dagli istologi, e più spesso 

 dai bacteriologi) si sortirebbe invece il risultato contrario : la sostanza 

 colorata precipitata sul nervo si ridiscioglierebbe, la colorazione si fa- 

 rebbe così più diffusa e mancherebbe totalmente allo scopo. 



Tuttavia non e' é alcun bisogno di sottoporre i preparati a dei mezzi 

 che rendono la reazione più circoscritta alle parti dotate di maggiore 

 affinità per la sostanza colorante. La reazione non è mai diffusa, anzi 

 é sempre nettamente circoscritta ed è relativamente facile. È tanto 

 facile che Dogibl (4) ha ridotto a metodo il tentativo già da altri fatto 

 di impregnare col turchino di metilene i tessuti staccati dall' organismo 

 e di lasciarli ossidare all' aria. A questo modo Dogiel potè dapprima 

 precipitare la tetrametil-dipara-amido-tiodifenilamina (base del turchino 

 di metilene) sulle sostanze cementanti degli endotelii, ed in lavori più 



