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Lilienfeld, Leon, und Achille Monti, 
Ueber die mikrochemische Localisation 
des Phosphors in den Geweben. (Zeit- 
schrift für physiologische Chemie. XVII. Bd. 
4. Heft. $. 410—424. 1892.) 
Die Verfasser haben mit Hilfe einer neuen 
mikrochemischen Methode verschiedene pflanzliche 
und thierische Gewebe nach ihrem Phosphorgehalt 
untersucht. Die Methode soll sowohl anorganische 
Phosphorsalze, wie auch den in eiweissartigen 
Stoffen fest gebundenen Phosphor mikrochemisch 
nachweisen. Die Schnitte waren zuerst mit einer 
salpetersauren Lösung von Ammoniummolybdat 
behandelt. »Der entstehende Niederschlag ist gelb, 
also nicht ohne Weiteres wahrnehmbar: er muss 
erst durch eine chemische Reaction in einen ge- 
färbten Körper verwandelt werden. « Dazu benutzen 
die Verf. die Reduction mit Pyrogallol. Die Prä- 
parate wurden, einige Minuten bis einige Stunden, 
mit Wasser gewaschen, um die Molybdaenammo- 
niumlösung zu entfernen, und mit 20. % Pyrogallol- 
lösung behandelt. »Das Pyrogallol redueirt die ge- 
bildete Phosphormolybdaensäure und es entsteht 
- demgemäss an den phosphorreichen Stellen des 
Präparates je nach dem Phosphorgehalte eine gelbe, 
braune oder schwarze Färbung«. 
Der Referent hat die beschriebene Methode näher 
probirt, wobei sich aber herausgestellt hat, dass die 
auftretende Schwärzung eine Folge der Reaction 
des aus dem Präparate nicht vollständig entfernten 
Molybdaenammoniums mit Pyrogallol ist, und mit 
dem Phosphorgehalte desselben keinen Zusammen- 
hang hat. 
Die Gewebeschnitte, welche mit salpetersaurem 
Molybdaenammonium (nach Fresenius) behandelt 
sind, zeigen, wie das die Verf. angegeben haben, 
eine »makroscopisch erkennbare, schwach gelbe 
Färbung«, welche jedoch schon allein durch das 
Eintreten der Xanthoproteinsäurereaction erklärt 
werden kann. Ist das Gewebe sehr reich an an- 
organischen Phosphorsalzen (z. B. Stengelspitzen 
von Zuphorbianerüfolia,Ovulavon Hippeastrum ete.), 
so erhält man einen schon makroscopisch sichtbaren 
gelben Niederschlag von der bekannten krystalli- 
nischen Beschaffenheit, welcher gewöhnlich in der 
Nähe des Präparates entsteht und nur bei sehr 
vorsichtiger Behandlung auch im Inneren der Zellen 
zu constatiren ist. Man ist nicht berechtigt anzu- 
nehmen, dass die diffuse gelbe Färbung, welche 
abgesehen von den mikroscopisch sichtbaren gelben 
Kıystallen des phosphormolybdaensauren Ammo- 
niums in Plasma und Zellkernen auftritt, eine 
andere Ursache habe, alsdie Xanthoproteinreaction, 
da für den Nachweis des Phosphors gerade das 
Auftreten von sichtbaren Krystallen charakteristisch 
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ist. Werden mit Ammoniummolybdat behandelte 
Stücke z. B. von Huphorbia mit Wasser gewaschen, 
so tingiren sich nach Zusatz von Pyrogallol die 
Kerne (Chromosomen und Nucleolen in gleicher 
Intensität) dunkler und das Plasma heller braun, 
während die in den Zellen enthaltenen Krystalle 
des phosphormolybdaensauren Ammoniums eine 
dunkelgrüne Farbe annehmen. Bei gleicher Be- 
handlung zeigen Stücke der so sehr calciumphos- 
phatreichen Zuphorbiagewebe eine braune Färbung 
von derselben Intensität, wie andere phosphorarme 
Gewebe. Dagegen ist die Intensität der Färbung 
proportional zur Dauer der Waschzeit. Voll- 
ständiges Auswaschen des molybdaensauren Am- 
moniums aus den Geweben ist sehr schwierig, da 
es besonders von den Kernen sehr fest gehalten 
wird, schon früher lösen sich die Krystalle des ev. 
vorhandenen phosphormolybdaensauren Ammo- 
niums, welche nach Fresenius in 10000 Wasser 
löslich sind, auf. Sind aber die Präparate gehörig 
ausgewaschen, so bekommt man mit Pyrogallol 
auch keine Bräunung mehr. 
Ebenso wenig kann man mit dieser Methode den 
in Nucleinen und Eiweissstoffen fest gebundenen 
Phosphor nachweisen. In der Asche von Hühner- 
eiweiss, Lachssperma oder von Embryosackbelegen 
(Fritillaria imperialis) ist Phosphor mit molybdaen- 
saurem Ammonium nachweisbar, dagegen zeigen 
dieselben Körper ohne Einäscherung auch nach 
48stündiger Behandlung mit demselben Reagens 
gar keine Reaction, es ist also die in ihnen fest 
gebundene Phosphorsäure durch diese Behandlung 
noch nicht abgespalten. Dennoch geben so be- 
handelte und dann gewaschene Präparate mit 
Pyrogallol eine schwarze oder braune Färbung der 
Kerne (inel. Nucleolen), eine mehr helle des Plasmas. 
Durch Wasser kann man diese schwarze Farbe ganz 
von den Schnitten entfernen, diese zeigen dann 
nach Verkohlung, mit molybdaensaurem Ammo- 
nium eine Phosphorreaction. 
Dass der Niederschlag des phosphormolybdaen- 
sauren Ammoniums mit Pyrogallol eine grüne, 
salpetersaures Molybdaenammonium dagegen eine 
braune Reaction giebt, kann man im Reagenzglase 
bestätigen. Differenzen in der braunen Färbung, 
welche die Verfasser gesehen und ausführlich be- 
schrieben haben, beweisen nur eine verschiedene 
Tingirbarkeit der untersuchten Gewebe durch die 
braune Lösung, welche nach Behandlung mit Pyro- 
gallol entsteht, und als solche haben sie für uns 
wenig Interesse. Wenn aber die Verf. die Richtig- 
keit ihrer Methode noch auf solche Weise bestätigen 
wollen, dass sie nicht tingirbare Gewebe mit 
Nucleinsäure oder Metaphosphorsäure durch- 
tränken, wonach dieselben eine diffuse Färbung 
mit Hilfe der beschriebenen Behandlung annahmen, 
