4 IV. Em. Mencl: 



Ježto lze očekávati, že nyní budou naše pozorování kontrollována, 

 doplňována a rozšiřována, nebude od místa sděliti zde methody, jakých 

 bude dlužno užíti pro čisté kultury. Výsledky získané u oněch zmí- 

 něných malých symbiontů Periplan ety pohnuly mě k tomu, porovnati 

 nějaký jiný druh na umělé půdě vypěstovaný. K účeli tomu zvolen 

 byl Bacillus megatherium na peptonové agar-gelatině. Kultury tohoto 

 druhu*) zpracovány dvojím resp. trojím způsobem za účelem porovnání 

 s praeparaty sušenými nebo teplem bez úplného vysušení fixovanými; 

 výsledky těmito novými methodami získané jsou takové, že je mohu 

 vřele pro další pozorování doporučiti. 



1. Kultura v obyčejné eprouvettě byla fixována tím, že na ni 

 nalito svrchu zmíněné fixáže, tak aby vznikl co možno vysoký sloupec, 

 za účelem lepšího vniknutí v kulturu (neboť zde vniká fixáž pouze 

 jednostranně). Fixace trvá 24 hodin. Pak vypíráme destillovanou vodou 

 (vyměňování tekutin musí se ovšem díti zvolna a opatrně, aby povlak 

 bacillň nebyl odplaven), kterou později nahradíme 45% alkoholem 

 s jodem. Po zaměnění tohoto alkoholu a ovšem po úplném odstranění 

 sublimatu rozštípeme kleštěmi eprouvettu a uvolníme tak sloupec živné 

 půdy i s kulturou. Živná půda má rosolovitou konsistenci, kterou 

 neztratí ani v absolutním alkoholu ani v paraffinu. Ostrým nožem 

 se opatrně seřízne kultura s tenkou vrstvou gelatiny a obvyklým způ- 

 sobem se zalije do zcela měkkého paraffinu, ve kterém se ve studenu 

 řeže. Řezy nutno lepiti bílkem. Touto methodou dostal jsem \p silné 

 série complétai, zcela pohodlně a bez obtíží. Přes to ovšem dlužno 

 doporučiti řezy aspoň 4 /* silné z důvodů zřejmých. 



2. Jinak možno obejíti se bez zalévání do paraffinu způsobem 

 následujícím: Zjednáme si emulsi bakteriovou přímo z kultury živé 

 nebo fixované. První methoda zdá se býti výhodnější. Postupujeme 

 tak, že na hodinovém sklíčku rozmícháme do kapky Mayerova glyce- 

 rinového bílku několik oček z kultury vzatých. Takto získanou emulsi 

 natřeme tence jemným štětečkem na podložní sklíčka. 



Obsahuje-li emulse živé mikroby, vložíme potřená skla do 

 fixáže ■ — opět na 24 hodin! — vypíráme, barvíme a zjasňujeme. Fixací 

 srazí se bílek a není potřebí tedy sušení. 



Užijeme-li k přípravě emulse fixovaných částek kultury, srážíme 

 bílek alkoholem nebo teplem. 



*) Tento materiál byl mi ochotně zaslán p. A. Rosamem, professorem v Plzni, 

 začež mu budiž na tomto místě vysloven upřímný dík zároveň i za jiné přátelské 

 služby mně prokázané. 



