SÉANCE DU 24 MARS 289 



ferme, est très lente, et la portion non dissoute est limitée par une sur- 

 face conique ce qui rend difficile l'appréciation de la longueur dissoute. 



Jai pensé obtenir de meilleurs résultats en substituant la gélatine à 

 l'albumine. Celle-ci a déjà été employée pour le dosage de divers fer- 

 ments par Fermi (1), mais dans des conditions mauvaises qui rendent 

 son procédé très critiquable. 



Voici commuent j'opère : 



Une solution aqueuse de gélatine à 10 ou 20 p. 100, colorée avec une 

 trace de violet de méthyle, et maintenue liquide au bain-marie, est 

 aspirée dans des tubes en verre mince de 1 à 2 millimètres de diamètre 

 intérieur (tubes à vaccin). Après solidification de la gelée, ces tubes sont 

 coupés, avec un bon couteau à verre, en fragments de 2 centimètres 

 environ de longueur et les fragments jetés dans la solution de trypsine 

 préalablement additionnée de son volume d'une solution aqueuse ren- 

 fermant 2 p. 100 de fluorure de sodium et 4 p. 1000 de carbonate de 

 sodium sec. On abandonne le tout à la température ordinaire, ou mieux 

 dans une étuve réglée à une température de 20 à 23 degrés. Il se dis- 

 sout, dans chaque tube, une longueur de gélatine d'autant plus grande 

 que la quantité de trypsine est plus élevée. 



Rien de plus simple que de mesurer cette longueur en portant le petit 

 tube sur une réglette de buis, divisée en demi-millimètres, sous un 

 microscope à très faible grossissement. 



La gélatine non attaquée est très nettement limitée par une surface 

 plane exactement normale à l'axe du tube. L'œil apprécie très facile- 

 ment des différences de longueur d'un dixième de millimètre. Avec un 

 tube d'un millimètpe de diamètre intérieur, et une gelée à 10 p. 100 de 

 gélatine, cette différence correspond à moins de un centième de milli- 

 gramme de gélatine dissoute. La sensibilité du procédé ne laisse donc rien 

 à désirer, et la dose de gélatine qui entre en dissolution est assez faible 

 pour ne pas modifier sensiblement la composition du liquide aml)ianl, 

 celui-ci fût-il réduit à quelques centimètres cubes. On entrevoit ainsi la 

 possibilité d'effectuer des recherches sur des quantités minimes de 

 ferment, qu'aucun autre procédé ne permettrait de doser. 



Je me suis assuré qu'une dissolution de carbonate de soude à 

 2 p. 1000 est sans action dissolvante sur la gélatine dans les conditions 

 de l'expérience. Toute dissolution doit donc être attribuée à une diastase, 

 et le procédé que j'indique peut ainsi servir à la recherche comme au 

 dosage de la trypsine. 



A ce double point de vue, la gélatine constitue un réactif bien plus 

 sensible de la trypsine que l'albumine cuite et môme que la fibrine. 

 Certaines solutions, trop diluées pour exercer sur l'albumine une action 

 appréciable, attaquent encore très nettement la gélatine. 



(1) Fermi. I Fermenti pf![)lici, Oiornale d. H. Acad, de Torino, 1890. 



