SÉANCE DU 12 M\I 461 



chiffre 33-34 correspondrait à un produit déjà altéré dans le sens de 

 notre hypothèse préalable; voici nos raisons : 



1° Du sang de cheval, défibriné; est filtré sur étamine, centrifugé, le sérum 

 est décanté de façon à enlever la couche des globules blancs; les globules 

 agités avec une solution de NaCl à :-5 p. 100 sont de nouveau centrifugés, le 

 liquide de lavage est décanté ; les globules repris par environ deux volumes 

 d'eau distillée se dissolvent, on centrifuge pour séparer les stroma ; la solu- 

 tion limpide est additionnée d'alcool de façon à atteindre 25 degrés, et on 

 met à la glacière. 



Toutes ces opérations peuvent être exécutées dans la même journée, de 

 sorte que la préparation est mise à cristalliser quelques heures après que le 

 sang est sorti des vaisseaux de l'animal. 



La première cristallisation, examinée au microscope, nous a toujours 

 donné des cristaux bien nets et bien propres; ces cristaux, séparés des eaux 

 mères par centrifugaiion, lavés avec l'alcool froid à 25 degrés, i-edissous dans 

 l'eau, sont remis à cristalliser comme la première fois. La recristallisation est 

 opérée encore une fois de la même manière. 



Les cristaux sont alors recueillis sur un filtre S., S, essorés à la trompe, 

 lavés à l'éther, finalement étendus sur une plaque de porcelaine dégourdie, 

 recueillis avec un couteau en platine, et mis à sécher jusqu'à poids constant 

 dans le vide froid et sec. 



2° Le sang défibriné est abandonné au repos pendant vingt-quatre heures ; 

 le sérum est décanté, les globules sont agités avec dix volumes de solution 

 de NaCl à 3 p. 100, puis abandonnés de nouveau au repos; le dépôt s'eifectue 

 très lentement et exige deux ou trois jours ; la purée de globules est alors 

 agitée avec trois volumes d'eau et un volume d'éther; séparation de l'éther 

 par décantation; filtration de la solution aqueuse sur papier; enfin addition 

 d'alcool et tout le reste comme ci-dessus. 



Le dosage du fer a été fait par le procédé colorimétrique. Ce procédé nous 

 donne la seconde décimale à une unité près; chaque échantillon a été soumis 

 à trois analyses au moins. 



L'hémoglobine à 0,29-0,30 de fer se présenle avec tous les caractères 

 d'un produit pur; en opérant suivant la technique que nous avons 

 indiquée, on arrive à un résultat constant (à nos quatre opérations, il 

 faut en joindre une exécutée par M. Dhéré en vue d'autres recherches, 

 et dont le produit, analysé par nous, a donné une proportion de fer de 

 0,29 p. 100). 



L'hémoglobine à 0,33-0,34 est obtenue dans des conditions qui mani- 

 festement laissent plus de place à une altération ; un des deux sangs 

 soumis à lii préparation lente a subi un commencement de putréfaction; 

 l'autre a donné, pour une portion, de l'hémoglobine à 0,34, pour une 

 deuxième portion, de l'hémoglobine à 0,29; ce qui montre que le pas- 

 sage de l'une à l'autre est pour ainsi dire accidentel ; nous n'en pou- 

 vons encore fixer le déterminisme. D'autre part, Zinofl'ski a obtenu son 

 hémoglobine à 0,335 de fer par une technique qui diffère de la nôtre; 



