136 M. Bleibtreu und E. Atzler: 



Die so gewonnenen Präparate wurden im Eisschrank aufbewahrt 

 und verloren während der Beobachtungszeit (bis 8 Wochen) nichts an 

 Wirksamkeit. Das Ziel, eine gut wirksame und, wie es scheint, 

 dauernd haltbare Fermentlösung zu erhalten, war also erreicht. 

 Allerdings ist die Fermentlösung auch jetzt noch mit anderen Sub- 

 stanzen vermischt, wahrscheinlich haftet noch ein Teil des- Caseins 

 neben Serumeiweißsubstanzen dem Ferment an, abgesehen von den 

 anorganischen Beimengungen. Ob eine weitere Reinigung gelingt, 

 müssen spätere Versuche lehren. 



Definitives Verfahren. 



Wir fassen noch einmal kurz den Gang der Darstellung unserer Fer- 

 mentlösung zusammen. 



Zusatz von Caseinpulver zu dem Serum, 1 g auf 100 ccm. 



Auflösen des Caseins im Schüttelapparat. 



Ausfällen des Caseins mit Essigsäure. 



Trocknen der Fällung im Vakuum. Pulverisieren. 



Auflösen des Pulvers in Wasser unter Zusatz von Normalnatronlauge 

 bis zur neutralen Reaktion (ungefähr 100 ccm Wasser auf 10 g des 

 Pulvers), 



Weiterer Zusatz von Normalnatronlauge: 1 Volumen Normal- 

 natronlauge auf 10 Volumen der Lösung. 



Neutralisieren mit n-Salzsäure. 



Zusatz von kolloidaler Eisenhydroxydlösung (liqu. Ferri oxyd. dialys. 

 Kahlbaum), (ungefähr 10 — 15 ccm der aufs 3 fache verdünnten 

 käuflichen Lösung auf 100 ccm) Zusatz von Magnesiumsulfatlösung 

 (ungefähr 2,5 ccm gesättigte Lösung auf 100 ccm). 



Trennen des Eisenniederschlages durch Zentrifugieren (Filtrieren 

 geht meist zu langsam). 



Versetzen der Lösung mit ^/g — ^/g Volumen Alkohol. 



Abtrennen der entstandenen Fällung durch Filtration. 



Aufbewahren des Filtrates im Eisschrank. 



Beim Gebrauch Zusatz des gleichen Volumen destillierten Wassers. 



Der Gang der Darstellung ist etwas umständlich. Wir fragten uns 

 daher, ob sich derselbe nicht vereinfachen läßt. 



Zunächst könnte das Trocknen des Caseinniederschlages überflüssig 

 erscheinen, da man ihn doch nachher wieder auflösen muß. Wir haben 

 uns aber wiederholt davon überzeugt, daß, wenn man den noch feuchten 

 Niederschlag verwendet und in genau gleicher Weise behandelt, die 

 Präparate weniger wirksam werden. Es durfte also auf das Trocknen 

 nicht verzichtet Averden. Das Trocknen hat auch den Vorteil, daß man 



