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A. Jodlbauer und F. Haffner: 



Konzenfrafion 

 von Rosebengak: 



Die Phosphatpuffergemenge wurden in der Weise hergestellt, daß zu einer Mischung 

 von 1,25 com Yj n. primären und 1,25 ccm ^/g n. sekundären Natriumphosphats 

 Vio n. NaOH beziehungsweise HCl in ansteigenden Mengen von 1 — 2 — 3 usw. 

 ccm zugegeben und mit Yio ^^- NaCl auf 10 ccm aiifgefüUt wurde. Die daraus re- 

 sultierenden von stark sauer bis stark alkalischer Reaktion abgestuften Puffer- 

 gemenge sind im folgenden nach der Anzahl der zugesetzten ccm HCl beziehungs- 

 weise NaOH bezeichnet^). 



Ohne Farbstoff Zusatz erfolgt bei 18° C nur in den Mischungen 

 mit über 4 ccm HCl und mit über 5 ccm NaOH Hämolyse. In den 

 dazwischen liegenden Mischungen (4 ccm HCl bis 5 ccm NaOH) tritt 

 innerhalb 24 Stunden keine Hämolyse ein. 



Bei Farbstoff Zusatz in bestimmten (niederen) Konzentrationen 

 kommt es auch in diesem Bereiche zu Hämolyse. In der 4 HCl-Mischung 

 bewirkt Hose bengale bereits in Konzentrationen von ^/soooo ^'^l- voll- 

 ständige Hämolyse . Mit Abnahme 

 der H'-Konzentration sind immer 

 höhere Farbstoffkonzentrationen 

 hierzu nötig : so in der 2 HCl- 

 Mischung V24000 mol., in der neu- 

 tralen Mischung ^/xsooo J^ol., in 

 der 4 NaOH-Mischung ^/gooo ^ol- 

 (siehe Abb. 1). 



Das Resistenzmaximum der 

 Blutkörperchen gegenüber Rose 

 bengale liegt im Bereich der 4 und 

 5 NaOH-Mischung, also in dem- 

 selben Alkalescenzbereich, in dem 

 das Resistenzmaximum der roten 

 Blutkörperchen gegen Hypoto- 

 nie 2) liegt. 



Mit Erhöhung der Farbstoff- 

 menge nimmt nun auf der Säureseite die hämolysierende Wirkung 

 der niederen Farbstoffkonzentrationen mehr und mehr ab und bleibt 

 bei genügend hoher Farbstoffkonzentration schheßlich ganz aus : in der 

 4 HCl-Mischung von I/12000 ^o^- ^^- ^^* Abnahme der H'-Konzentra- 

 tion sind hierzu immer höhere Farbstoffkonzentrationen nötig, so in 

 der 3 HCl-Mischung: ^/gooo moL, in der 2 HCl-Mischung: ^/looo "^o^- 





V 



















\ 



















\ 

















VZVOOOmo/ 





\ 



















\ 











/ 



ViZOOOmol 



Veooomo/ 



Puffer- 







\ 











/ 











\ 



^ 





/ 



















isc/iunam/f < 



f32 23U56 



//a 



/i/aOH 



Abb. 1. Lytiache Grenzkonzentrationen von 

 Rose bengale bei verschiedener Reaktion (voll- 

 ständige Auflösung 1 % Blutkörperchensuspen- 

 sionen innerhalb 24 Std.). 



^) Die für die einzelnen HCl-, bzw. NaOH-Phosphatmischimgen früher mittels 

 Indikatoren gefundenen pH-Werte konnten neuerdings von F. Haffner mittels 

 Gaskettenmessung im Wesentlichen bestätigt werden. Es ergaben sich folgende 

 Werte : 



Puffermischungen 



5 HCl 



4 HCl 



3 HCl 



2 HCl 



2 NaOH 



SNaOHj 



4 NaOH 



5 NaOH 6 NaOH 



pH 



2,98 



5,12 



5,96 



6,21 



6,77 7,23 



7,48 



8,25 



10,26 10,78 



2) Haff ner, Arch. f. d. ges. Physiol. 119, 144. 1920. 



