328 M - Kjöllerfeldt: 



konstantes Benzidin von hoher Farbenaktivität bei einem Benzidin- 

 monochlorhydrat zu finden ist, resp. dort, wo sich das Benzidin zum 

 HCl verhält wie 1 : 1. 



Die Verdünnungsgrenze, auf eine Totalflüssigkeitsmenge von 

 2 ccm bezogen, war im ersten Falle (mit Benzidin Ia) 1 : 2000000(>< 

 und im zweiten (mit Benzidin A) 1:2000000. 



Indem ich mir die Erkenntnis zwischen dem Zusammenhang von 

 Azidität und Wasserlöslichkeit einerseits und von Farbenaktivität und 

 Schwerlöslichkeit anderseits zunutze machte, ging ich jetzt daran, mir 

 aus einem käuflichen Benzidinchlorhydrat die erwünschte Benzidin- 

 monochlorhydratlösung empirisch herzustellen. Ich besass ein Benzi- 

 dinum hydrochloricum purum von Grübler in Leipzig. Von diesem 

 stellte ich eine bei 20 ° C. gesättigte Lösung her und bestimmte die 

 Azidität dieser Lösung. 10 ccm derselben wurden von 23 ccm 



^r^r -NaOH mit Phenolphtalein als Indikator neutralisiert. Hierbei 



fiel die Base aus. 



Um nun die Azidität der ursprünglichen Benzidinlösung für die 

 optimale Farbenintensität zu ermitteln, ging ich folgend ermaassen 

 weiter vor. 



Fünf Kolben, mit 1, 2, 3, 4, 5 bezeichnet, wurden mit je 10 ccm; 

 bei 20 ° C. gesättigter Benzidinlösung beschickt und zu diesen steigende 



Mengen ^r^-NaOH zugefügt, und zwar zum ersten Kolben ccnv 



zum zweiten 5 usw. 10, 15 und 20 ccm. 



In fünf Reagenzgläsern, ebenfalls mit 1, 2, 3, 4, 5 bezeichnet, 

 befanden sich je 0,0001 ccm Blut in 1 ccm Aqua dest. 



Diesen Gläsern wurde 1 ccm Lösung von den gleich bezeichneten 

 Kolben zugegeben und hierauf 0,1 ccm 3°/oiges H 2 2 zugesetzt. 



Die Farbenintensität war nach 3 Minuten folgende: 

 Glas 12 3 4 5 



+(+) ++ ++++ ++ + 



Dieses Ergebnis zeigte mir, dass ich im Glase 3, dort, wo ich die 

 Azidität meiner Benzidinlösung um fast die Hälfte heruntergedrückt 

 hatte, die stärkste Farbenreaktion erreichte. 



Damit war die Einstellung auf 1 HCl im dritten Kolben noch nicht 

 genau, und da mir für die Wegneutralisation des zweiten HCl eine 



genaue -^-NaOH- Lösung zur Verfügung stand, wollte ich mir vor der 



