Beitrag zur Kenntnis der Peroxydase des Blutes. 337 



Methodisches. 



Von den Befunden Begemanns über den Einfluss der Kon- 

 zentration, der Reagentien, der Temperatur und der Zeit bei der 

 Farbenreaktion pflanzlicher Oxydationsfermente im System Per- 

 oxydase-Benzidin-H 2 2 ausgehend, stellte ich durch Vorversuche die 

 für die Oxydationsreaktion des Blutes günstigste Methode fest 



Das „Fliesspapierverfahren" nach Begemann ist von mir wohl 

 geprüft, aber weiter nicht benutzt worden, weil es im Vergleich zu 

 seinem „Reagenzglasverfahren" zu umständlich und ohne irgendwelche 

 Vorteile in bezug auf die Reinheit des Farbentones beim Blute ist. 

 Weiter benutzte Begemann für seine quantitativen Versuche eine 

 Farbenskala von blaugefärbten Garnen, um bei der Farbenreaktion das 

 auftretende Benzidinblau kolorimetrisch bestimmen zu können. 



Bei der Benzidinblaureaktion des Blutes stand mir keine 

 passende Serie blauer Fabrikmuster zur Verfügung. Daher schlug 

 ich ein anderes Verfahren zur vergleichenden Bestimmung der 

 Menge der jeweils vorhandenen Peroxydase ein. 



Das in den Vorversuchen ermittelte, günstigste Mengenverhältnis 

 unter den drei Faktoren des Systems Blut-Benzidin-H 2 2 war für die 

 im folgenden beschriebene Benzidinlösung 1 ccm und für das H 2 2 0,1 ccm 

 einer 3 °/o igen Lösung. Von dem Benzidin benutzte ich im Anfange 

 meiner Versuche, ähnlich wie Begemann, eine bei 45° C. gesättigte 

 Chlorhydrat-Lösung und notierte nach 1 Minute die Farbenintensität 

 der Oxydationsreaktion. Diese bei 45° C. gesättigte Benzidinchlor- 

 hydrat- Lösung habe ich wegen ihrer Inkonstanz verlassen, und bei 

 den Versuchen über die quantitative Peroxydasewirkung des Blutes 

 von gesunden und kranken Menschen und von Tieren kam eine 



^r-Benzidinmonochlorhydrat-Lösung als Chromogen bei Zimmer- 

 temperatur zur Anwendung. 



Die auf ihre Peroxydasewirkung quantitativ zu untersuchende Sus- 

 pension oder Lösung (Blut, Metallsalz u. a.) wurde in fallenden Mengen 

 in 1 ccm Aqua dest. in eine Serie Reagenzgläser gebracht, ähnlich wie in 

 der Serologie verfahren wird und wie aus den nachfolgenden Tabellen 

 ersichtlich ist. Jedem Reagenzglas wurde hierauf 1 ccm Benzidinlösung 

 und 0,1 ccm 3°/oiges H 2 2 hinzugefügt und die Farbeniutensität nach 

 1, 3, oder 5 Minuten, je nach der Geschwindigkeit der Oxydations- 

 reaktion, notiert. Doch wurde für die verschiedenen Gläser ein und 

 derselben Serie immer dieselbe Beobachtungszeit — d. h. die Zeit bis 



Pflüger's Archiv für Physiologie. Bd. 172. 22 



