Über die versch. Methoden, Pepsin und Trypsin quantit. zu bestimmen etc. 223 



Versuche x ) auf diese Weise ausgeführt sind, so ist doch sicher, dass 

 hier die Verfahren mit flüssigen Eiweisslösungen oder mit Fibrin zu 

 schnellerem und besserem Ziel führen. 



C. Eine einfache Methode zur quantitativen Bestimmung 

 von Pepsin und Trypsin. 



Diese Methode stellt ihrer Art nach eine Modifikation des 

 G r ü t z n e r ' sehen Verfahrens mit Karminfibrin dar. Zu ihrer Aus- 

 führung kam ich bei Arbeiten mit der Trypsinbestimmung nach 

 Palladin, welcher nach einem Vorschlag von Prof. Bülow zur 

 Färbung des Fibrins Spritblau-bläulich verwendete. Dieser Farb- 

 stoff, der ein schönes dunkelviolettes Pulver darstellt und von den 

 Farbenfabriken vorm. Bayer u. Co. in Elberfeld geliefert wird, 

 ist Diphenyl-Rosanilin ; er ist unlöslich in Wasser und wässerigen 

 Lösungen, dagegen leicht löslich in Alkohol und etwas schwerer in 

 Glyzerin. 100 g des Präparates kosten etwa 1,10 Mark. Palladin 

 verfuhr nun bei der Färbung des Fibrins, indem ich mich an seine 

 eigene Beschreibung halte, folgendermaassen : „Der Farbstoff wurde 

 in Alkohol aufgelöst und das saubere, zerschnittene und in Glyzerin 

 aufbewahrte Fibrin nochmals mit einer Schere fein zerschnitten und 

 in dieser gesättigten FarbstofflösuDg 48 Stunden liegen gelassen, 

 wodurch es eine schöne dunkelviolette Farbe annimmt. Dieses blaue 

 Fibrin wurde in Glyzerin, in welchem Spritblau bis zur Sättigung 

 gelöst war, aufbewahrt, da solches Fibrin weicher bleibt und besser 

 verdaut wird als dasjenige, welches dauernd in Alkohol liegt." 



Als ich im physiologischen Institut zu Tübingen unter Leitung 

 von Herrn Prof. v. Grützner über Fermentwirkungen arbeitete, 

 schien mir bei Benutzung des Pal lad in' sehen Fibrins, besonders 

 bei geringen Fermentmengen, seine Wirkung nicht kräftig genug. 

 Dies rührt sicherlich daher, dass das Fibrin durch die Färbung in 

 alkoholischer Lösung seine Weichheit verliert, die es auch in dem 

 Glyzerin nicht wieder erlangt. 



Ich färbte daher das Fibrin in Glyzerin, welches mit Sprit- 

 blau-bläulich im Überschuss versetzt und dann filtriert war, damit 

 nicht ungelöste Farbteilchen sich an das Fibrin anhafteten und eine 



1) R. Kaufmann, Über den Einfluss von Protoplasmagiften auf die Trypsin- 

 verdauung. Zeitschr. f. pbysiol. Cbemie Bd. 39 S. 434. 1903. — L. Po Hak, 

 Zur Frage der einheitlichen und spezifischen Natur des Pankreastrypsins. Hof- 

 meister's Beitr. z. ehem. Physiol. Bd. 6 S. 95. 1905. 



