474 Otto Warburg und Rudolf Wiesel: 



Blausäure. Als Material wurden rote Vogelblutzellen benutzt, die 

 in möglichst konzentrierter Suspension, suspendiert in einer 0,9°/oigen 

 Natriumchloridlösung, vermischt wurden mit einer 0,9 °/oigen Natrium- 

 chloridlösung , die die zu prüfende Substanz enthielt. Bei leicht- 

 löslichen Substanzen bestimmten wir die Verteilung, wie Hedin 1 ), 

 durch Messung des Gefrierpunkts vor und nach dem Vermischen. 

 Bei den schwerlöslichen — es handelte sich um wenige Kubikzenti- 

 meter äusserst verdünnter Lösungen — standen geeignete chemische 

 Methoden nicht zur Verfügung. Wir gingen deshalb so vor, dass 

 wir aus der Atmung der Zellen , die wir zum Verteilungsversuch 

 benutzten, die Konzentrationen der Substanzen in der umspülenden 

 Flüssigkeit berechneten. Im einzelnen gestaltet sich die Methode, 

 die einer allgemeinen Anwendung fähig erscheint, folgendermaassen : 

 2,5 ccm einer Zellsuspension werden in drei bekannten Konzentra- 

 tionen einer Substanz mit grossen Mengen Lösung bis zum Gleich- 

 gewicht gewaschen und schliesslich auf 5 ccm aufgefüllt. Weiterhin 

 werden 2,5 ccm derselben Suspension mit verschiedenen Mengen 

 einer Lösung vermischt, die die betreffende Substanz in bekannter 

 Konzentration enthält. Die Mischungen werden dann zentrifugiert 

 und die Zellen gleichfalls auf 5 ccm gebracht, wobei *zu beachten ist, 

 dass zum Auffüllen die durch Zentrifugieren gewonnene überstehende 

 Flüssigkeit benutzt werden muss. Wir haben dann schliesslich sechs 

 Röhrchen, alle gleiche Zellmengen im gleichen Volumen enthaltend ; 

 die Konzentrationen der zu prüfenden Substanzen in der umspülenden 

 Flüssigkeit sind für die ersten drei Röhrchen bekannt, für die letzten 

 drei unbekannt. Man bestimmt nun in allen sechs Röhrchen den 

 Sauerstoffverbrauch, der, wie anfangs erwähnt, durch die Konzentration 

 der hemmenden Substanz in der umspülenden Flüssigkeit definiert ist, 

 und erhält drei Atmungsgrössen bei bekannter, drei bei unbekannter 

 Konzentration; aus diesen Daten sind die unbekannten Konzen- 

 trationen durch Interpolation berechenbar (siehe Versuche Nr. IV). 

 Ein grosser Vorteil der Methode ist u. a. der, dass die Ver- 

 teilung bei denjenigen Konzentrationen bestimmt wird , bei denen 

 die Stoffe wirken ; dass man nicht nötig hat, grössere Konzentrationen 

 als die wirksamen zu benutzen, weil solche die Zellen meist töten. 

 Die Verteilungen sind also alle an lebenden Zellen 

 gemessen. Das Resultat war folgendes: 



1) loc. cit. 



