tJntersuchung-en über die Agglutination der roten Blutkörperchen. 601 



in einer elektrolytfreien Suspensionsflüssigkeit untersucht wurde. 

 Als solche hielten wir eine 9,7proz. Rohrzuckerlösung am geeignetsten, 

 zumal wir uns von der an sich schon agglutinierenden Wirkung des 

 Rohrzuckers ein stärkeres Hervortreten auch kleinerer Agglutinations- 

 unterschiede versprachen. Leider ist die Wirkungsweise des Rohr- 

 zuckers noch sehr umstritten, und auch eigene Untersuchungen führten 

 zu keinem abschließenden Urteil. Verwendet wurden nur frisch be- 

 reitete Lösungen mit einem p^ 6,80 bis p^ 6,90. 



Es zeigte sich nun in Vorversuchen, daß z. B. Serumblk., ohne 

 Waschung sofort in die Phosphatgemische eingetragen, abzentrifugiert 

 und in Rohrzuckerlösung suspendiert, komphzierte, auch variable 

 Agglutinationskurven ergaben, deren Deutung vorerst unmöglich er- 

 schien. Wir nahmen an, daß dies von den den Blk. anhaftenden Eiweiß- 

 resten des Serums herrühre, und strebten daher nach Erzielung einer 

 möglichst weitgehenden Eiweißfreiheit der Blk. -Oberfläche. In der 

 Überlegung, daß die adsorbierten Eiweißkörper in ionisiertem Zustand 

 leichter abwaschbar sein dürften, wurde folgender Versuch angestellt: 



Rinderblk. wurden aus dem Serum scharf abzentrifugiert und 

 gleiche Mengen (je 1 ccm) mit Phosphatpuffern von 2% 7,35, p^ 5,37 und 

 p^3,6S und mit 0,9proz. NaCl-Lösung 3 mal unter kräftigem Durch- 

 schütteln gewaschen, mit Rohrzuckerlösung einmal nachgewaschen 

 und erneut in zwei Puffergemische (A: p^ 5,28 und B:^^; 4,52) ein- 

 getragen, darin einmal durchgeschüttelt, mit Rohrzuckerlösung nach- 

 ge waschen und in je 6 ccm Rohrzuckerlösung suspendiert. 



Tabelle I. 



Waschlösimg 

 Phosphatgemisch oder NaCl 



Eingetragen in Puffer 

 PH 5,28 



Pn 

 nachge- 

 messen 



Agglutination 

 in Rohrzucker 



Eingetragen in Puffer 

 PS 4,52 



Pn 

 nachge- 

 messen 



Agglutination 

 in Rohrzucker 



1. p^ 7,35 



2. 25h 5,37 



3. ps^ 3,63 



4. 0,9proz. NaCl- Lösung 



5,33 

 5,33 

 5,33 

 5,29 



X X 

 X X X X 

 X X X X 



4,81 

 4,93 

 4,55 

 4,97 



(X) 



XXX 



X X X X 



XXX 



Das geringe Agglutinationsvermögen der mit p^ 7,35 gewaschenen 

 Blk. läßt darauf schließen, daß bei dieser Reaktion die Ablösung der 

 adsorbierten Eiweißkörper von der Plasmahaut am besten gelungen ist. 



Dementsprechend wurde nun folgende Methode II angewandt: 

 Rinderplasmablk. 5 mal mit Phosphatgemisch p^ 7,4 gewaschen, 

 16 Stunden im gleichen Puffer auf Eis suspendiert, dann mit Rohr- 

 zuckerlösung nachgewaschen. Je 0,25 ccm dieser Blk. wurden in je 

 7 ccm Puffer von p^ 6,0 bis p^ 3,0 eingetragen, abzentrifugiert, mit 



