SÉANCE DU 7 DÉCEMBRE 609 



instantanée si l'on fait arriver à la surface du liquide des vapeurs 

 d'ammoniaque. 



Ce processus de coloration, verte par le brome, bleue par addition 

 d'alcool, et de décoloration par des vapeurs d'ammoniaque, constitue 

 une réaction sensible de la bilirubine. 



Tous nos essais ont été faits avec de la bilirubine (extraite de calculs 

 biliaires humains) en solution au 1/50.000 dans le chloroforme purifié 

 par lavage à l'eau et dessiccation sur le chlorure de calcium. 



Nous avons appliqué cette méthode à la recherche de la bilirubine 

 dans les liquides qui peuvent en contenir, soit à l'état physiologique, 

 soit à l'état pathologique. 



A titre d'exemple, nous décrirons la technique que nous avons employée 

 pour la recherche de la bilirubine dans le plasma ou le sérum du sang de 

 cheval. 



2 centimètres cubes de plasma sont additionnés de 4 centimètres cubes 

 d'alcool à 95 degrés. On agite quelques instants et on filtre. Le filtrat jaune 

 ainsi obtenu est étendu de trois fois son volume d'eau, puis agité avec 

 3 centimètres cubes de chloroforme. On recueille la couche inférieure chlo- 

 roformique, qui s'est légèrement teintée en jaune, puis on évapore à siccité 

 dans une capsule de porcelaine. Il reste un résidu rougeâtre contenant de la 

 bilirubine ; ce résidu est repris par du chloroforme pur qui se colore en jaune 

 d'or. On ajoute alors 2 ou 3 gouttes d'une solution de brome à gr. 02 p. 100 

 environ dans le chloroforme; la liqueur jaune devient verte. Dans cette 

 solution chlorol'ormique verte, si on fait tomber une goutte ou deux d'alcool 

 pur, on a immédiatement le passage au bleu intense. Il suffit de promener 

 au-dessus de la surface du liquide bleu la pointe d'un agitateur préalable- 

 ment plongé dans une solution d'ammoniaque pour observer la décoloration 

 instantanée. 



Ce procédé est également applicable à la recherche de la bilirubine 

 dans le sérum humain, le liquide d'ascite, l'urine, etc. Si on avait 

 affaire à des bilirubinates, il serait nécessaire de mettre la bilirubine en 

 liberté. 



L'alcool précipite les albuminoïdes, et en particulier l'hémoglobine; 

 il en résulte que le sérum, lorsqu'il est teinté de rouge, étant débar- 

 rassé de l'hémoglobine par le premier traitement à l'alcool, peut être 

 utilisé pour la recherche de la bilirubine. 



Il importe, pour ces réactions, d'avoir du chloroforme pur et sec. 



Dans le but d'éviter les actions secondaires possibles du brome sur 

 le chloroforme, nous avons employé des solutions de bilirubine et de 

 brome dans lebromoforme; les résultats ont été identiques. 



[Travail du laboratoire de physiologie de la Sorbonne.) 



