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Ebullition 2 minutes. Filtration sur coton. Exprimer le coton dans l'entonnoir. 



6° Refroidir à 50 degrés. Addition de un blanc d'œuf pour 500 centimètres 

 cubes. Porter à l'autoclave pendant 20 minutes à 120 degrés. 



1° Addition de 0,9 gr. glucose pure anhydre pour 100 centimètres cubes. 

 Filtration sur papier Chardin. 



8° Répartir en tubes ou vases stérilisés. Porter à l'autoclave pendant 20 mi- 

 nutes à 115 degrés. 



Préparation de la gélose. — 1°, 2°, 3°, 4°, 5° (de même que précédemment); 



6° Refroidir à 50 degrés. Addition de un blanc d'œuf et de 8,5 gr. de gélose 

 lavée et essorée pour 500 centimètres cubes. Porter à l'autoclave pendant 

 45 minutes à 120 degrés. 



7° Addition de 0,9 gr. glucose pure anhydre pour 100 centimètres cubes. 

 Filtration sur papier Chardin. 



8° Répartir en tubes ou vases stérilisés. Porter à l'autoclave pendant 20 mi- 

 nutes à 115 degrés. 



• Préparation de la gélatine et autres milieux. — Agir comme avec un bouillon 

 ordinaire en utilisant le « bouillon intestinal » après la filtration sur papier 

 Chardin. 



Obs. I. — La technique de la préparation est la même avec le tube digestif 

 du mouton et du porc. Il est à noter cependant qu'avec le mouton, l'estomac 

 à suc gastrique est seul utilisé, ainsi que la langue, pour l'auto-digestion; de 

 plus, on laisse de côté pour la macération toute la partie amincie du gros 

 intestin contenant les matières en chapelet. Ce bouillon de mouton ou de 

 porc est encore un milieu de choix pour les espèces intestinales; il n'est tou- 

 tefois pas aussi parfaitement adapté à leur culture que le précédent. Il en 

 est de même du « bouillon intestinal » préparé avec la macération seule 

 d'intestin de veau ou de porc. 



Obs. II. — Le bouillon intestinal fait avec la poule est surtout approprié à 

 la flore microbienne delà poule et de la plupart des oiseaux. Dans la prépa- 

 ration, on supprime l'auto-digestion stomacale que l'on remplace par l'addi- 

 tion de 500 centimètres cubes de peptone Martin à une macération faite avec 

 les tubes digestifs et organes annexes de trois poules. On supprime égale- 

 ment les collages. 



Obs. III. — Quand on veut obtenir des cultures de surface très abondantes, 

 et lorsque la transparence de la gélose importe peu, on supprime les fillra< 

 tions et les collages, quel que soit l'animal utilisé; c'est-à-dire qu'après le pas- 

 sage sur la passoire (4°) on alcalinise, on ajoute la glucose. La répartition est 

 faite aussitôt après, puis on distribue dans les récipients la gélose lavée et 

 essorée, à raison de 1 gr. 7 pour 100 grammes de bouillon. Ensuite, on fait 

 une unique stérilisation de 50 minutes à 115 degrés. 



Le milieu obtenu de la sorte est extrêmement riche en matières nutri- 

 tives et permet d'obtenir une culture des plus intensives. 



Ainsi, dans le « bouillon intestinal » on retrouve, bien que modifiées 

 par les phases diverses de la préparation, la plupart des substances 

 solubles qui se trouvent dans l'intestin. L'expérience m'a montré, pen- 

 dant ees six dernières années, que les microbes de la flore intestinale 



