SÉANCE DU 14 NOVEMBRE 439 



à manier. Aussi avons-nous cherché au moyen de divers sels d'argent 

 et l'emploi de divers albuminates d'argent à colorer facilement et cons- 

 tamment le spirochète dans les frottis sur lames. Nous avons essayé 

 successivement le protargol, le collargol, le novargan, l'argyrol, etc. 

 Nous n'avons obtenu de bons résultats qu'avec la Largine de Lilienfeld. 

 La technique de la coloration est la suivante. 



1° Recueil du matériel. — Le frottis est fait sur des lames très propres 

 selon la méthode ordinaire. 



2° Fixation. — Nous avons employé les vapeurs d'acide osmique. un 

 mélange d'acide osmique et de bichromate de potasse ou d'acide chro- 

 mique et même tout simplement l'alcool méthylique. 



3° Imprégnation. — La solution de Largine est faite à deux grammes 

 pour cent grammes d'eau distillée. Elle doit être récente et conservée 

 dans des flacons jaunes. 



Les lames fixées sont immergées dans la solution de Largine. puis 

 mises pendant deux heures à l'étuve à 55 degrés. Le cylindre Borrel 

 avec prisme intérieur et couvercle, pour éviter l'évaporation, est très 

 recomniandable. 



On les passe ensuite, sans les laver, dans un bain d'acide pyrogal- 

 lique très pur à 5 p. 100. La réduction se fait instantanément et un 

 séjour de quelques minutes est suffisant. Il est préférable de passer la 

 lame d'un premier bain d'acide pyrogallique, qui se noircit vite, dans 

 un second plus propre. 



On lave ensuite la lame à l'eau distillée, puis on lui fait subir un nou- 

 veau séjour d'une demi-heure dans la Largine, toujours à l'étuve ; on 

 réduit à nouveau dans l'acide pyrogallique et l'examen peut être fait 

 aussitôt après. 



Grâce à ce procédé; en opérant avec soin, il ne se fait jamais de pré- 

 cipité comme avec le nitrate d'argent. Les spirochètes sont colorés en 

 brun foncé et peuvent être noirs si l'on augmente le nombre des bains 

 successifs. Les autres microbes sont également colorés en noir intense. 

 Les éléments cellulaires sont très bien imprégnés; il y aurait même 

 intérêt, au point de vue histologique, à comparer des frottis imprégnés 

 par cette méthode à des coupes de tissus imprégnés par la méthode 

 ordinaire, au nitrate d'argent. Au point de vue bactériologique, nous 

 avons coloré presque tous les microbes, des spirilles, des trypano- 

 somes. 



En outre, nous avons pu imprégner en deux heures et demie des spi- 

 rochètes de la syphilis, d'une façon très intense, dans des frottis relati- 

 vement épais, ce qu'il est impossible de faire av«c le Giemsa ou les 

 autres méthodes, en raison de l'abondance des précipités. 



Le seul inconvénient que nous ayons constaté est l'affaiblissement 

 Biologie. Comptes rendus. — 1908. T. LXV. 32 



