SÉANCE DU 12 DÉCEMBRE 621 



bleu, au lieu de porter à l'ébullition, suivant le procédé classique, l'urine 

 simplement additionnée de quelques gouttes d'acide acétique, il devenait 

 logique d'opérer en présence d'oxydants (d'autant plus que l'urine exerce 

 sur le bleu une certaine action réductrice) : dans ce cas, l'acide joue le rôle 

 d'agent hydrolysant vis-à-vis du chromogène conjugué et l'oxydant agit 

 ensuite directement sur le leucodérivé à l'état libre. Parmi les divers oxydants 

 que nous avons employés à cet effet, l'eau oxygénée et les persulfates sont les 

 mieux appropriés : ajoutés en excès, ils ne produisent pas de décoloration du 

 bleu formé, à l'inverse de certains autres (hypochlorites, nitrites); le perchlo- 

 rure de fer, les chlorates ne conviennent pas non plus. 



Notre technique pour la recherche du bleu dans l'urine est donc la 

 suivante. On porte à V ébullition quelques centimètres cubes d'urine conte- 

 nant quelques gouttes d'acide acétique, on ajoute ce. 5 à / centimètre 

 cube d'eau oxygénée ou quelques gouttes d'une solution de persulfate 

 d'ammoniaque à 5 p. 100 ou simplement un cristal du même sel, et Von 

 continue à chauffer quelques instants; le liquide, qui sous l'influence de 

 la chaleur et de l'acide acétique n'avait pris qu'une teinte verte plus ou 

 moins foncée ouvert bleu, se colore immédiatement en bleu franc par addi- 

 tion de l'oxydant, et cette coloration atteint tout de suite son intensité 

 maxima. Si l'urine contient peu de chromogène, on obtient seulement 

 une teinte vert bleu ou verte, mais toujours infiniment plus marquée 

 que celle produite par la simple chaleur acétique; en tout cas cette teinte 

 n'augmente pas par la suite Au contraire, avec l'emploi de l'acide acé- 

 tique seul, on n'a jamais à l'ébullition la coloration d'emblée maxima, qui 

 ne se manifeste qu'au bout de douze à vingt-quatre heures. 



Dans le cas de H 2 2 , la teinte obtenue est très stable; dans le cas d'un 

 excès de persulfate, elle peut virer plus ou moins au vert bleu (par suite de 

 l'acidité résultant de la décomposition du sel). Elle disparaît à nouveau sous 

 l'influence de l'hydrogène naissant (Zn-f-HCL) et se régénère par réaddition 

 d'oxydant. — C'est bien sur le chromogène qu'agissent H 2 2 et le persulfate, 



— et non sur le bleu déjà formé, — car chauffés en milieu acétique avec une 

 solution de bleu ils n'augmentent nullement sa coloration. — On peut effec- 

 tuer les mêmes réactions en chauffant l'urine préalablement additionnée d'acide 

 acétique et d'oxydant, au lieu d'ajouter l'oxydant après ébullition avec l'acide. 



— Si la coloration naturelle de l'urine gêne la netteté des réactions, on 

 opère, comme on le fait habituellement pour la recherche du bleu par le 

 procédé ordinaire, sur Vitrine dêféquée à l'acétate de plomb. — Dans le cas 

 d'urine contenant un mélange de bleu, de chromogène d'élimination et de chromo- 

 gène de fermentation, pour séparer les trois, on extrait d'abord le bleu en 

 nature parle chloroforme; on agite ensuite fortement à l'air l'urine décantée, 

 et on l'extrait à nouveau par le chloroforme, qui dissout le bleu provenant du 

 chromogène de fermentation ; il ne reste plus qu'à traiter par l'oxydant acé- 

 tique l'urine à nouveau décantée pour en extraire, par le chloroforme, le bleu 

 provenant du chromogène d'élimination. 



Comme oxydants, on peut encore employer les perborates, les peroxydes 



Biologie. Comptes rendus. — 1908. T. LXV. 45 



