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Présidence de M. Retterer, vice-président. 



MM. J. CouRMONT et Cl. Regaud, membres correspondants, assistent 

 à la séance. 



Présence de la capsule dans les cultures de Pneumocoque et de Pneu- 



MOBACILLE SUR MILIEUX ARTIFICIELS. Sa MISE EN ÉVIDENCE PAR LE PROCÉDÉ 



de l'encre DE Chine. 



Note de Jules Hardouin, présentée par F. Widal. 



Il est de notion classique que le pneumocoque et le pneamobacille de 

 Friedlânder perdent leur capsule dans les milieux de culture artificiels, 

 tels que la gélose, le bouillon, l'eau peptonée. Les procédés jusqu'ici en 

 usage ne permettent pas, en effet, de déceler ces formations dans les 

 milieux précédents. 



Or, il est facile de se rendre compte que l'impossibilité de colorer la 

 capsule dans ces conditions, ne correspond pas à l'absence réelle dfr 

 l'auréole périmicrobienne. En employant un procédé de coloration spé- 

 cial, celui de l'encre de Chine, il nous a été possible de mettre en évi- 

 dence, de façon constante, de très belles capsules autour des pneumo- 

 coques et des pneumobacilles cultivés sur gélose, sur eau peptonée et 

 sur bouillon. A cet effet, nous avons modifié de la façon suivante la 

 méthode de coloration par l'encre de Chine, utilisée antérieurement 

 pour la recherche des tréponèmes dans les sérosités pathologiques. 



Une goutte delà culture à examiner est déposée à l'une des extrémités 

 d'une lame de verre; à l'aide d'une pipette, on dépose au contact même 

 de cette goutte une goutte d'encre de Chine ; on mélange très rapide- 

 ment les deux liquides et, aussitôt, on pratique leur étalement, à l'aide 

 d'une lame rodée, comme s'il s'agissait d'une goutte de sang. La prépa- 

 ration ainsi effectuée, est séchée par agitation, puis fixée (le plus sim- 

 ple est de la recouvrir de quelques gouttes d'alcool absolu, que l'on 

 enflamme). On colore enfin par le bleu de toluydine, le bleu de méthy- 

 lène phéniqué ou le Ziehl, pendant deux ou trois minutes. Lavages à 

 l'eau, à l'alcool, au xylol. 



Sur les préparations ainsi obtenues, les capsules du pneumocoque et 

 du pneumobacille apparaissent avec une netteté parfaite, découpées 

 comme à l'emporte-pièce, en clair, sur le fond gris noir de l'encre de 

 Chine. A leur centre, on aperçoit les éléments microbiens, colorés en 



