SÉANCE DU 24 FÉVRIER 319 



tageux de pouvoir faire un dosage colorimélrique direct, après une 

 purification sommaire. 



Grigaut s'est servi de la réaction Liebermann-Burchardt. Malheureu- 

 sement cette réaction, excellente pour caractériser la présence de la 

 cholestérine, est absolument mauvaise pour son dosage. Elle à le défaut 

 très grave de varier en fonction du temps d'une façon inégale suivant 

 la quantité de cholestérine qui se trouve en solution. 



Elle varie aussi beaucoup suivant la grosseur des gouttes d'acide 

 sulfurique et surtout les impuretés. 



La glycérine retarde la réaction et donne des chiffres inférieurs à la 

 réalité. D'autres substances l'accélèrent et parmi celles-ci il faut signaler 

 les protéines et certains dérivés insaponifiables qui accompagnent 

 toujours la cholestérine en quantité variable et sur la nature de laquelle 

 on n'est pas fixé; enfin l'oxycholestérine, sur laquelle Gérard attire 

 trèsjustementratlention, trouble considérablementlaréaction colorante. 



C'est pour toutes ces raisons que j'ai renoncé à la coloration Lieber- 

 mann-Burchardt. 



11 existe une autre réaction colorante de la cholestérine signalée par 

 Tschugaïeff et qui donne des résultats très satisfaisants. Cette réaction 

 n'évolue pas avec le temps, elle est fixe et définitive au bout de cinq 

 minutes, beaucoup moins impressionnable quant aux impuretés et ne 

 donne de mauvais résultats qu'en présence d'acides gras, dont il est 

 aisé de se débarrasser. C'est cette réaction que je propose pour le dosage 

 clinique de la cholestérine. 



Dosage clinique. — Tous les extraits éthérés de sérum saponifié, 

 d'une part, celui provenant du traitement des savons, d'autre part, sont 

 débarrassés de toutes traces d'acides gras par un dernier traitement à 

 l'alcool absolu potassique cinquième normal, comme je l'ai indiqué 

 dans ma note précédente. 



On dessèche les résidus terminaux et on les reprend à l'acide acé- 

 tique anhydre de manière à avoir en tout 3 ce. On ajoute à cette solu- 

 tion 2 c. c. de chlorure d'acétyle et un gramme de chlorure de zinc. 

 On chauffe les deux tubes, ainsi préparés, pendant cinq minutes, 

 au bain-marie bouillant, en même temps qu'un tube témoin préparé 

 exactement de la même manière avec une solution acétique titrée de 

 cholestérine. Au bout de cinq minutes, les trois tubes ont pris une belle 

 couleur rouge fluorescente. On n'a plus qu'à mesurer au colorimètre. 



Voici quelques exemples : 



l** Sérum humain, saponification une demi-heure (NaOH 1 °/o). 



Purification et dosage par pesée gr. 60 par litre. 



Le résidu considéré par Grigaut comme épii^sé est repris, saponifié avec 

 un quart de son poids de soude caustique pendant deux heures. 



Et on retrouve par pesée gr. 85 de cholest. par litre. 



